骨形態(tài)發(fā)生蛋白2,7-聚乳酸-羥基乙酸共聚物復(fù)合支架的制備及其細(xì)胞成骨能力研究.pdf

1、目的：研制一種可同時(shí)釋放骨形態(tài)發(fā)生蛋白2和骨形態(tài)發(fā)生蛋白7的生物活性支架，用于干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)分化的應(yīng)用研究。
　　方法：制備出合適的BMP2微球(B2MS)和BMP7微球(B7MS)。采用相分離的手法制備PLGA三維多孔支架。采用改良的二氯甲烷熏蒸法，將BMP微球粘附在PLGA支架上，形成BMP2-PLGA復(fù)合支架(B2MS-PSC)和BMP7-PLGA復(fù)合支架(B7MS-PSC)，并檢測BMP2和BMP7的緩釋效果。將人來源的骨

2、髓間充質(zhì)干細(xì)胞種植在復(fù)合支架中，研究支架上的細(xì)胞粘附能力、細(xì)胞增殖能力，及其成骨分化能力。
　　結(jié)果：⑴成功制備同時(shí)負(fù)載BMP2微球和BMP7微球的PLGA復(fù)合支架(B2B7MS-PSC)。在本次實(shí)驗(yàn)的9天培養(yǎng)過程中，在培養(yǎng)的第3天B2B7MS-PSC的堿性磷酸酶(ALP)明顯高于不含BMP微粒的支架(P＜0.05)，在第6天堿性磷酸酶(ALP)高于B2MS-PSC，B7MS-PSC(P＜0.01)。⑵電鏡觀察9天后所有的樣品都能

3、展現(xiàn)出良好的細(xì)胞粘附形態(tài)，支架上基本所有的細(xì)胞以細(xì)胞群體的形式，粘附在三維的多孔結(jié)構(gòu)空間上，細(xì)胞之間聯(lián)系十分為緊密，部分細(xì)胞還能看見顯著的細(xì)胞偽足結(jié)構(gòu)。⑶培養(yǎng)6天后，B2B7MS-PSC上細(xì)胞的增殖能力高于其它支架(P＜0.01)。⑷細(xì)胞培養(yǎng)第9天B2B7MS-PSC支架的1型膠原蛋白(COL-1，collagen type-1)、骨鈣素(OCN，osteocalcin)、骨保護(hù)素(OPG，osteoprotegerin)和骨橋蛋白(O