乙肝相關(guān)性慢性肝病患者腸道菌群的比較及核苷類抗病毒藥物對其的影響.pdf

1、目的：探討慢性乙型病毒性肝炎、失代償期肝硬化和肝衰竭等不同類型的乙肝相關(guān)性慢性肝病患者腸道菌群的特點，以及應(yīng)用核苷類抗病毒藥物治療對此類疾病的患者腸道菌群的影響，為乙肝相關(guān)性慢性肝病的治療及預(yù)防提供新思路。
　　方法：本研究中共納入58例的研究對象，其中慢性乙型病毒性肝炎23例，肝衰竭6例，失代償期肝硬化20例，健康人9例；乙肝相關(guān)性慢性肝病患者按是否應(yīng)用核苷類藥物分為核苷類抗病毒藥物治療組29例（CHB12例、HF2例、LC15

2、例）、未用抗病毒藥物治療組20例（CHB11例、HF5例、LC4例）。所有研究對象均采集清晨糞便標本進行腸道菌群檢測；應(yīng)用糞便細菌基因組DNA提取試劑盒提取糞便腸道菌群DNA及NanoDrop ND-1000機器檢測DNA濃度，進行腸道菌群DNA擴增，并應(yīng)用16srDNA測序技術(shù)分析腸道菌群DNA。應(yīng)用相關(guān)生物學(xué)軟件和統(tǒng)計學(xué)軟件對測序結(jié)果進行分析，比較不同乙肝相關(guān)性慢性肝病患者腸道菌群的差異及核苷類抗病毒藥物對其腸道菌群的影響。

3、　　結(jié)果：
　?。?）不同乙肝相關(guān)性慢性肝病中腸道菌群多樣性比較中，對shannon指數(shù)應(yīng)用方差分析發(fā)現(xiàn)：健康對照組（3.2208±0.5797）＞慢性乙型病毒性肝炎組（2.6775±0.7150）＞失代償期肝硬化組（2.4137±0.6087）＞肝衰竭組（1.9478±0.9013）；不同乙肝相關(guān)性慢性肝病中腸道菌群豐度比較中，對observed species指數(shù)應(yīng)用方差分析發(fā)現(xiàn)：慢性乙型病毒性肝炎組（863.40±341.1

4、9）＞健康對照組（783.00±229.68）＞失代償期肝硬化組（579.30±266.42）＞肝衰竭組（372.83±252.76）。
　?。?）不同類型的乙肝相關(guān)性慢性肝病的腸道菌群在門分類水平的比較中顯示不同菌群在不同病種中所占的比例不同，但每類疾病均以厚壁菌門和擬桿菌門為主。廣古菌門僅在健康人組存在，梭桿菌門僅在慢性乙型病毒性肝炎和失代償期肝硬化中有出現(xiàn)且均較健康人體內(nèi)的數(shù)量多。變形菌門(p＜0.05)在失代償期肝硬化組中

5、明顯比CHB組多。
　?。?）核苷類抗病毒藥物對乙肝相關(guān)性慢性肝病腸道菌群多樣性的影響分析發(fā)現(xiàn)，健康對照組、核苷類藥物抗病毒治療組和未抗病毒治療組三組患者shannon指數(shù)中位數(shù)分別3.0、2.4和2.25。在各病種多樣性的比較中：（A）慢性乙型病毒性肝炎患者抗病毒藥物治療組比未抗病毒治療組多出丁酸梭菌等3種腸道細菌，且這3種細菌重新出現(xiàn)后豐度與正常人群比較基本無差異。（B）肝衰竭患者抗病毒治療組比未抗病毒組腸道內(nèi)多14種細菌，1

6、0腸道細菌豐度與健康人無差異，但Coprococcus-eutactus(p=0.04)、Bacteroides-clarus(p=0.036)、Eubacterium-ventriosum(p=0.028)和Ruminococcus-bromii(p=0.015)4種腸道細菌出現(xiàn)后較正常人豐度增加；（C）失代償肝硬化患者抗病毒治療組比未抗病毒組腸道內(nèi)多出Akkermansia-muciniphila等3種細菌，但又比健康人缺失Bact

7、eroides-nordii。核苷類抗病毒藥物對乙肝相關(guān)性慢性肝病腸道菌群豐度的影響中發(fā)現(xiàn)：總體來說未抗病毒治療組（3699）＞核苷類藥物抗病毒治療組（3430）＞健康組（1729）。（A）慢性乙型病毒性肝炎抗病毒治療者與未抗病毒治療者腸道菌群豐度的比較中，Bacteroides-coprocola(p=0.015)和Bacteroides-plebeius(p=0.009)具有顯著的統(tǒng)計學(xué)差異，且抗病毒治療后以上2種腸道菌群明顯減少。

8、（B）肝衰竭抗病毒治療者與未抗病毒治療者腸道菌群豐度比較中，Roseburia-inulinivorans(p=0.049)和Ruminococcus-lactaris(p=0.049)具有顯著的統(tǒng)計學(xué)差異，且抗病毒治療后以上2種腸道菌群豐度增多。（C）失代償期肝硬化抗病毒治療者與未抗病毒治療者腸道菌群豐度的比較中無明顯統(tǒng)計學(xué)差異。
　　（4）比較核苷類抗病毒藥物對不同乙肝相關(guān)性慢性肝病腸道菌種構(gòu)成的影響中發(fā)現(xiàn)：（A）慢性乙型病毒

9、性肝炎患者抗病毒藥物治療組比未抗病毒組多出丁酸梭菌等3種腸道細菌，且這3種菌豐度與正常人群比較基本無差異。（B）肝衰竭抗病毒治療組比未抗病毒組患者腸道內(nèi)多出14種細菌，Aeromonas-salmonicida、Alloscardovia-omnicolens和Clostridium-bartlettii等10細菌豐度與健康人無差異，Coprococcus-eutactus(p=0.04)、Bacteroides-clarus(p=0.

10、036)、Eubacterium-ventriosum(p=0.028)和Ruminococcus-bromii(p=0.015)4種腸道細菌重新出現(xiàn)后較正常人增多；（C）失代償期肝硬化患者抗病毒治療組比未抗病毒組多出Akkermansia-muciniphila、Bacteroides-clarus和Sutterella-parvirubra3種細菌且與正常人比較無差異，但是較正常人腸道內(nèi)缺失Bacteroides-nordii(p=

11、0.018)。
　　結(jié)論：
　?。?）慢性乙型病毒性肝炎、肝衰竭和失代償期肝硬化各類乙肝相關(guān)性慢性肝病具有獨特的腸道菌群。
　　（2）不同乙肝相關(guān)性慢性肝病中腸道菌群多樣性和豐度均隨著病情的不斷加重呈逐漸減少的趨勢。
　?。?）不同乙肝相關(guān)性慢性肝病中腸道菌群的構(gòu)成在門分類水平均以厚壁菌門和擬桿菌門為主，但是有所差別。廣古菌門僅在健康人中存在，梭桿菌門在慢性乙型病毒性肝炎和失代償期肝硬化患者中均有出現(xiàn)且均較健康人