乙肝病毒相關性肝病患者幽門螺旋桿菌感染的研究.pdf

1、目的：研究原發(fā)性肝癌、肝硬化、慢性肝炎等肝病患者幽門螺旋桿菌感染情況；進一步探討幽門螺旋桿菌(Helicobacter pylori，HP)的感染與原發(fā)性肝癌、肝硬化、慢性肝炎等肝臟疾病的關系。
　　 方法：
　　 1.收集原發(fā)性肝癌、肝硬化、慢性乙肝等肝臟疾病患者556例，肝功能正常的體檢人群60例，采用免疫層析法檢測患者血清中anti-H.pylori IgG。
　　 2.篩選40例石蠟標本(原發(fā)性肝癌20例

2、、胃癌7例、肺癌4例、膽管癌4例、直腸癌5例)，提取DNA，以螺桿菌屬特異基因16S rRNA及Hp特異性抗原基因26-kDa為引物，進行PCR(Polymerase chain reaction，PCR)擴增，檢測各類組織Hp感染情況；免疫組化法進一步研究Hp感染情況。
　　 結果：
　　 1.肝病患者血清anti-H.pylori IgG檢測結果
　　 1)研究發(fā)現(xiàn)乙肝病毒相關性肝病患者(包括乙型肝炎、乙肝后

3、肝硬化、乙肝后肝癌)Hp感染者200例(73.3％)，其他肝臟疾病Hp感染者126例(44.5％)，正常人群組Hp感染者24例(40.0％)，三組比較乙肝病毒相關性肝病患者Hp感染率明顯高于乙肝病毒陰性的肝病患者及正常人群，x2檢驗有極顯著性差異(P<0.001)；
　　 2)乙型肝炎、乙型肝炎后肝硬化、乙型肝炎后肝癌三組患者的感染率分別為62.7％、77.0％、79.7％，三組比較，后兩者感染率明顯高于單純乙型肝炎患者，x2檢

4、驗提示顯著性差異(P<0.05)，而乙肝后肝硬化患者與乙肝后肝癌患者感染率比較無顯著性差異；
　　 3)慢性肝病中非乙肝相關性肝硬化、非乙肝相關性肝癌、其他肝臟良性病變?nèi)M感染率分別為47.0％、48.2％、40.3％，各組間x2檢驗提示無顯著性差異(P>0.05)；
　　 4)HBV DNA活動者按病毒載量分級后，各級別的Hp感染率分別為69.0％、60.7％、70.5％，x2檢驗提示各級之間無顯著性差異(P>0.05

5、)；
　　 5)HC患者按Child-push分級后，A、B、C各級之間的Hp感染率分別為51.9％、63.4％、65.6％，x2檢驗提示各級之間無顯著性差異(P>0.05)。
　　 6)HC與HE患者感染率分別是65.3％、58.8％，兩者比較無顯著性差異(P>0.05)。
　　 2.石蠟肝癌組織中螺桿菌基因的檢測結果
　　 1)在20例肝癌標本中有9例擴增出400bp的目的片段(16S rRNA)，陽

6、性率45.0％，7例胃癌中6例陽性，陽性率為85.7％，而非肝癌組無1例陽性，與胃癌患者比較差異顯著(P<0.05)，與其他癌癥標本比較有顯著性差異(P<0.01)。
　　 2)9例螺桿菌16S rRNA基因陽性的石蠟標本再用26-kDa基因的引物擴增，結果有6例顯示陽性，陽性率66.7％，胃癌標本陽性率100％。
　　 3.石蠟組織免疫組化染色結果
　　 1)20例肝癌標本中有6例觀察到了彎曲狀或桿狀的細菌存在

7、，陽性率30.0％。而非肝癌組未觀察到細菌的存在，二者比較差異顯著(P<0.05)；
　　 2)胃癌標本中4例(57.1％)觀察到彎曲狀細菌存在，與肝癌組織相比差異顯著(P<0.01)。
　　 結論：
　　 1.調(diào)查顯示乙肝病毒相關性肝病患者與其他肝病患者及正常人群相比，更容易感染Hp；隨著病情加重，Hp感染率明顯增高，提示Hp可能加重乙肝病情，顯示Hp具有肝細胞毒性作用；肝硬化、肝癌、肝性腦病Hp感染率較高，提

8、示Hp感染與慢性肝病患者并發(fā)癥(如肝性腦病)的發(fā)生有一定相關性。
　　 2.研究顯示，原發(fā)性肝癌組織中存在幽門螺旋桿菌感染，提示幽門螺旋桿菌的感染可能與肝癌的發(fā)生存在一定的關系；9例螺桿菌16S rRNA基因陽性的石蠟標本中有3例標本H.pylori種特異性抗原基因26-kDa陰性，提示肝內(nèi)可能存在與Hp種系高度相似的其他肝螺旋桿菌；均獲得目的片段的6例肝癌組織中，有3例HBsAg陽性，就Hp與HBV在肝癌的發(fā)生過程中是否存在協(xié)