辛伐他汀對COPD大鼠血漿中EMPs表達(dá)的影響.pdf

1、目的：觀察內(nèi)皮細(xì)胞微粒（endothelial microparticles，EMPs）在慢性阻塞性肺疾?。–hronic obstructive pulmonary disease，COPD，簡稱慢阻肺）模型大鼠血漿中的表達(dá)及辛伐他汀對它表達(dá)的影響，探討辛伐他汀延緩COPD病情進(jìn)展可能存在的機(jī)制。
　　方法：⑴將30只健康SPF級SD雄性大鼠隨機(jī)平均分為正常對照組（正常組）、慢性阻塞性肺疾病模型組（COPD組）、辛伐他汀干預(yù)組（

2、干預(yù)組）。⑵采用煙熏聯(lián)合2次氣管內(nèi)注入脂多糖(LPS)法建立大鼠慢阻肺模型;干預(yù)組自香煙煙霧暴露之日起使用辛伐他汀以5mg/kg劑量灌胃，每日一次，干預(yù)4周;第30天處死全部大鼠，取支氣管肺泡灌洗液(BALF)進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)、分類，肺組織切片HE染色，鏡下觀察各組大鼠肺組織、支氣管病理形態(tài)學(xué)改變，并通過測量肺平均內(nèi)襯間隔(MLI)及肺泡破壞指數(shù)(DI)評估大鼠肺氣腫及肺泡破壞程度。⑶采用流式細(xì)胞技術(shù)檢測各組大鼠血漿中CD31+/CD42b

3、-EMPs的表達(dá)百分比、原位末端標(biāo)記法（TUNEL）檢測肺組織細(xì)胞的凋亡程度并計算凋亡指數(shù)(AI)、免疫組化法檢測半胱氨酰天冬氨酸特異性蛋白酶-3(caspase-3)的表達(dá)水平并計算積分光密度值(IOD)。⑷分別對血漿中的EMPs與BALF的中性粒細(xì)胞百分比(N％)、caspase-3IOD值、AI進(jìn)行相關(guān)性分析。
　　結(jié)果：①COPD組大鼠肺組織病理學(xué)改變的特點高度符合慢阻肺改變。②BALF細(xì)胞計數(shù)、分類:中性粒細(xì)胞百分比及細(xì)

4、胞總數(shù):COPD組、干預(yù)組較正常組升高(P＜0.05)，而干預(yù)組較COPD組的中性粒細(xì)胞百分比及細(xì)胞總數(shù)降低(P＜0.05);巨噬細(xì)胞百分比:COPD組、干預(yù)組較正常組下降(P＜0.05)，干預(yù)組較COPD組升高(P＜0.05)，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。③MLI及DI: COPD組、干預(yù)組MLI及DI均高于正常組(P＜0.05)，而干預(yù)組較COPD組的MLI及DI下降(P＜0.05)，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。④流式細(xì)胞儀測血漿中CD31+/CD

5、42b-EMPs的表達(dá)水平:COPD組、干預(yù)組EMPs表達(dá)百分比高于正常組(P＜0.05)，干預(yù)組EMPs的表達(dá)則低于COPD組(P＜0.05)，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。⑤TUNEL法檢測肺組織細(xì)胞的凋亡及測量AI值:COPD組、干預(yù)組肺組織細(xì)胞的凋亡程度明顯強(qiáng)于正常組(P＜0.01)，而干預(yù)組較COPD組則有所減輕(P＜0.01)。⑥免疫組化法檢測caspase-3蛋白酶的表達(dá)并計算其IOD值:COPD組、干預(yù)組肺組織中caspase-3

6、蛋白酶的表達(dá)明顯強(qiáng)于正常組(P＜0.01)，而干預(yù)組caspase-3的表達(dá)較COPD組有所下降(P＜0.05)。⑦相關(guān)性分析:EMPs與BALF中的中性粒細(xì)胞比成正相關(guān)(r=0.792，P＜0.01)，與TUNEL法測得的AI值成正相關(guān)(r=0.897，P＜0.01)，與caspase-3的IOD值成正相關(guān)(r=0.938，P＜0.01)。
　　結(jié)論：⑴EMPs水平在COPD大鼠的血漿中升高，可能與炎癥損傷肺組織血管內(nèi)皮細(xì)胞導(dǎo)致