ATM-NF-κB在白花丹素提高舌癌細(xì)胞放療增敏中的作用.pdf

1、目的：在細(xì)胞水平明確白花丹素對(duì)舌癌SCC9細(xì)胞放射增敏效應(yīng)的作用及主要機(jī)制。
　　方法：1.體外培養(yǎng)舌癌SCC9細(xì)胞，采用臨床上X線直線加速器分別以五種不同劑量（0 Gy、2 Gy、4 Gy、6 Gy、8Gy）照射舌癌SCC9細(xì)胞，放射后繼續(xù)培養(yǎng)6h、12h、24h、48h。2、應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)各組細(xì)胞周期，選取最佳實(shí)驗(yàn)時(shí)間及劑量作為實(shí)驗(yàn)中放射處理?xiàng)l件。3.運(yùn)用MTT法檢測(cè)不同濃度的白花丹素（0.5、1.0、2.0、4.0、8.

2、00μm/L）對(duì)舌癌SCC9細(xì)胞的毒性作用，并計(jì)算最佳實(shí)驗(yàn)濃度IC10。4.設(shè)空白組、放射組、白花丹素組、聯(lián)合組（白花丹素+放射），同時(shí)設(shè)平行組加 ATM抑制劑 KU-55933作比較；5.流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)各組舌癌SCC9細(xì)胞的凋亡率。6. Western Blot檢測(cè)舌癌SCC9細(xì)胞中ATM、p-ATM、NF-κB的表達(dá)變化。
　　結(jié)果：1.流式細(xì)胞術(shù)確定實(shí)驗(yàn)條件為：放射劑量為4Gy，放射后培養(yǎng)時(shí)間為24h。2.MTT檢測(cè)表明：白

3、花丹素對(duì)舌癌 SCC9細(xì)胞增殖抑制濃度 IC10為1.34μm/L（24h）。3.流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)凋亡結(jié)果為：白花丹素聯(lián)合放療后，舌癌SCC9細(xì)胞的凋亡率明顯增高(P<0.05)。4.Western Blot檢測(cè)顯示，白花丹素能夠抑制放射激活A(yù)TM、NF-κB蛋白表達(dá),加入KU-55933有效抑制ATM蛋白的活化時(shí)，各組中NF-κB蛋白表達(dá)無(wú)明顯變化。
　　結(jié)論：抑制ATM/NF-κB信號(hào)通路是白花丹素提高舌癌細(xì)胞的放療敏感性的主要