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文檔簡(jiǎn)介
1、目的：觀察養(yǎng)精膠囊是否通過上調(diào)POU3F1促進(jìn)GC-1細(xì)胞的增殖，并探討其具體的信號(hào)通路機(jī)制。
方法：以體外小鼠精原細(xì)胞系GC-1細(xì)胞培養(yǎng)為模型，用無血清培養(yǎng)液誘導(dǎo)GC-1細(xì)胞凋亡，繼而加入養(yǎng)精膠囊提取液(0.01，0.1，1 mg/mL)作用48小時(shí)后，用MTT法檢測(cè)細(xì)胞的活性;實(shí)時(shí)熒光定量PCR法和Western blot法檢測(cè)POU3F1的mRNA和蛋白質(zhì)的表達(dá);利用POU3F1 siRNA，GFRα1 siRNA和LY
2、294002分別阻斷GDNF-PI3K/Akt-POU3F1通路的上下游，探究其作用機(jī)制。
結(jié)果：養(yǎng)精膠囊提取液加入GC-1細(xì)胞后，能夠顯著增加細(xì)胞的活力，POU3F1的mRNA和蛋白質(zhì)的表達(dá)水平增加;使用POU3F1 siRNA，GFRα1 siRNA和LY294002處理后，明顯抑制了養(yǎng)精膠囊提取液對(duì)GC-1細(xì)胞的增殖，降低了養(yǎng)精膠囊提取液對(duì)POU3F1的mRNA和蛋白質(zhì)的表達(dá)。
結(jié)論：養(yǎng)精膠囊提取液能促進(jìn)GC-
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