C57BL-6小鼠EAE模型CNS中IBA1、IL-10及IL-1β的動(dòng)態(tài)表達(dá)及其發(fā)病機(jī)制的探討.pdf

1、分類號(hào)：密級(jí)：UDC：學(xué)號(hào)：416522813645南昌大學(xué)專業(yè)學(xué)位碩士研究生學(xué)位論文C57BL6小鼠小鼠EAE模型模型CNS中IBA1、IL10及IL1β的動(dòng)態(tài)表達(dá)及其發(fā)病機(jī)制的探討的動(dòng)態(tài)表達(dá)及其發(fā)病機(jī)制的探討ExplationoftheIBA1IL10IL1βCNSdynamicexpressionpathogenesisofEAEmodelofC57BL6mice曾紅培養(yǎng)單位（院、系）：江西省人民醫(yī)院指導(dǎo)教師姓名、職稱：吳曉牧教授

2、主任醫(yī)師申請(qǐng)學(xué)位的學(xué)科門類：醫(yī)學(xué)學(xué)科專業(yè)名稱：神經(jīng)病學(xué)論文答辯日期：2016年5月30日答辯委員會(huì)主席：評(píng)閱人：2016年5月30日摘要II摘要目的目的：建立MOG3555的C57BL6小鼠實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎（ExperimentalAutoimmuneEncephalomyelitis，EAE）模型，檢測(cè)其發(fā)病早期（第7天），發(fā)病高峰期（第15天）和恢復(fù)期（第28天）時(shí)腦組織中與免疫調(diào)節(jié)相關(guān)的小膠質(zhì)細(xì)胞（IBA1）、各時(shí)期促炎因

3、子（如IL1β）及抗炎因子（如IL10）的表達(dá)的動(dòng)態(tài)變化，神經(jīng)功能評(píng)分和體重計(jì)數(shù)變化。本實(shí)驗(yàn)初步探討了EAE腦脊髓組織內(nèi)的小膠質(zhì)細(xì)胞免疫相關(guān)的作用；觀察各個(gè)發(fā)病時(shí)期EAE腦組織病理學(xué)，免疫學(xué)水平的動(dòng)態(tài)變化；進(jìn)一步探討EAE的發(fā)病機(jī)制，為中樞神經(jīng)系統(tǒng)脫髓鞘疾病的發(fā)病機(jī)制及尋求新的治療方法提供進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法：方法：1、將30只8周齡（體重1520g）C57BL6雌性小鼠隨機(jī)分成正常對(duì)照組和EAE組，其中21只小鼠建立EAE模型，采用

4、第0天皮下注射200ug的MOG混合劑（MOG3555和CFA在真空中按1:1混合制成混合劑）分別于第0天和第2天腹腔注射200ng的PTX，正常組9只注射同等計(jì)量的PBS。對(duì)正常組及免疫后的EAE組的小鼠每天采取神經(jīng)功能評(píng)分和體重的測(cè)量。2、分別在免疫后的第5天，第15天和第28天發(fā)病階段取其腦脊髓組織制成連續(xù)石蠟切片，并進(jìn)行HE染色，LuxolFastBlueEosin雙染，觀察其炎癥細(xì)胞和髓鞘脫失情況。3、免疫組化法測(cè)定腦脊髓組織

5、小膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志物（IBA1）、免疫因子白介素因子10（IL10）、白介素因子（IL1β）的表達(dá)。結(jié)果結(jié)果：1、MOG3555多肽誘導(dǎo)模型C57BL6小鼠的一般情況及神經(jīng)功能評(píng)分MOG誘導(dǎo)小鼠免疫平均5.021.54天煩躁，消瘦，末尾張力消失，隨后后肢無力，后肢麻痹等癥狀。平均臨床評(píng)分為2.161.42分，第15天發(fā)病癥狀呈持續(xù)性且最嚴(yán)重，沒有顯著緩解，為疾病高峰期。癥狀28天之后稍微降低，但仍然輕度神經(jīng)功能缺損。實(shí)驗(yàn)對(duì)照組和對(duì)照組中顯著