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1、目的:通過(guò)了解SAP發(fā)生時(shí)腸道通透性改變與腸道菌群移位的關(guān)系,探討腸道通透性改變?cè)谀c源性感染中的機(jī)制;觀察益生菌對(duì)SAP腸道通透性的效果,探討益生菌改善腸道通透性的作用機(jī)制。
方法:(1)54只健康雄性SD大鼠,體重250~300g,隨機(jī)分成3組;假手術(shù)組(A組,n=18)、SAP組(B組,n=18)、益生菌制劑治療組(C組,n=18)。(2)假手術(shù)組僅開(kāi)腹,翻動(dòng)胰腺,并關(guān)腹。SAP組用3%?;悄懰徕c制備SAP大鼠動(dòng)物模型。益
2、生菌制劑治療組用3%?;悄懰徕c制備SAP大鼠動(dòng)物模型,麻醉清醒后,用濃度為10%益生菌溶液(雙歧桿菌四聯(lián)活菌片,1ml/100g/次,Bid)灌胃。(3)三組大鼠分別在造模后12小時(shí)、24小時(shí)、48小時(shí)三個(gè)時(shí)間點(diǎn)麻醉動(dòng)物后取材,每個(gè)時(shí)間點(diǎn)6只大鼠。無(wú)菌條件下取下腔靜脈血8ml,采用鱟試劑偶氮基質(zhì)顯色法檢測(cè)內(nèi)毒素,生化自動(dòng)分析儀檢測(cè)血清淀粉酶水平,酶標(biāo)雙抗體夾心ELISA法測(cè)定TNF-α,IL-6,血清D-乳酸水平。(4)取胰腺組織行HE
3、染色,并采用kusske標(biāo)準(zhǔn)行病理評(píng)分,觀察胰腺損傷程度;在距回盲部約10cm處取長(zhǎng)約5cm的腸管,行HE染色,采用改良的Chiu氏評(píng)分法評(píng)價(jià)腸粘膜損傷程度。以上收集的數(shù)據(jù)用mean±SD((x)±s)表示,采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,樣本均數(shù)的比較采用單因素方差分析(one-wayanova),p<0.05認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)果:(1)B組(SAP組)血清淀粉酶水平在12h、24h和48h三個(gè)時(shí)間點(diǎn)均高
4、于A(SO組)組(P<0.05),C組(益生菌制劑治療組)血清淀粉酶的水平高于A組,在12h、24h比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05),在48h與A組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),C組血淀粉酶水平較SAP組低,但比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。(2)B組(SAP組)內(nèi)毒素水平在12h、24h和48h三個(gè)時(shí)間點(diǎn)均高于A(SO組)組(P<0.05)。C組(益生菌制劑治療組)內(nèi)毒素水平較A組高,在12h、24h比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<
5、0.05),在48h與A組同一時(shí)間點(diǎn)相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。C組內(nèi)毒素水平低于SAP組,在24h、48h與SAP組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),在12h相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。(3)B組(SAP組)和C組IL-6水平在12h、24h和48h三個(gè)時(shí)間點(diǎn)均高于A組(P<0.05)。C組IL-6水平低于SAP組,在12h和48h與SAP組相比,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),在24h比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.0
6、5)。(4)SAP組和C組在12h、24h和48hTNF-a水平均高于A組(P<0.05)。C組TNF-a水平低于SAP組,在12h、24h與SAP組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),在48h相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。(5) SAP組在24h和48hD-乳酸水平高于A組(P<0.05),在12h與A組比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。C組在24h的D-乳酸水平高于A組(P<0.05),在12h和48h與A組同時(shí)間點(diǎn)比
7、較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。C組D-乳酸水平低于SAP組,在24h和48h與SAP組比較(P<0.05),在12h比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。(6) SAP組和C組胰腺的病理評(píng)分在12h,24h,和48h均高于假手術(shù)(A)組(P<0.05),C組胰腺病理評(píng)分在各時(shí)間點(diǎn)低于SAP組(P<0.05)。(7) SAP組在12h,24h和48h三個(gè)時(shí)間點(diǎn)回腸組織的病理評(píng)分高于SO組(P<0.05),C組病理評(píng)分高于SO組,但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意
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