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文檔簡介
1、目的:
1.通過檢測HT患者甲狀腺組織中SOCS1/3、TLR3蛋白的表達及外周血中SOCS1/3、TLR3mRNA的表達,探討SOCS1/3、TLR3在HT發(fā)病中的作用及具體機制;
2.通過檢測 HT患者外周血中 Tfh細胞占淋巴細胞的百分比和特征性轉(zhuǎn)錄因子Bcl6mRNA的表達,探討Tfh細胞在HT中的作用;
方法:
1.選取30例HT患者、10例GD患者及10例正常的甲狀腺組織標本,采用免疫
2、組化法(IHC)檢測SOCS1/3及TLR3蛋白在各組甲狀腺組織的表達與定位,并對結(jié)果進行半定量評分;
2.收集30例HT患者、30例GD患者及30例正常人的外周血,F(xiàn)icoll密度梯度離心法分離 PBMC,提取 PBMC中總 RNA,實時熒光定量 PCR檢測SOCS1/3、TLR3mRNA的表達量;
3.流式細胞術(shù)檢測30例HT患者、30例GD患者及30例正常人外周血中CD4+CXCR5+T細胞(Tfh細胞)占淋巴
3、細胞的百分比;Ficoll密度梯度離心法分離外周血PBMC,實時熒光定量PCR檢測Bcl6mRNA的相對表達量;
結(jié)果:
1. TLR3蛋白在GD組及正常組甲狀腺組織幾乎不表達,在HT組主要表達部位在濾泡上皮細胞的胞漿內(nèi),且HT組表達量明顯高于GD組及正常組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);
2. SOCS1/3蛋白在GD組、正常組甲狀腺組織中有少量表達,主要表達部位在濾泡上皮細胞的胞漿,而在HT組的表達
4、較GD組及正常組明顯,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);
3.外周血PBMC中TLR3、SOCS1/3 mRNA的相對表達量在HT組均高于GD組和正常組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);
4. HT組患者外周血中Tfh細胞百分比高于GD組及正常組,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),HT組外周血PBMC中Bcl6mRNA的相對表達量高于其余兩組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);
5. HT患者外周血PB
5、MC中SOCS1mRNA的相對表達量與血清TGAb水平呈負相關(guān)(r=-0.393),與TPOAb、FT3、FT4、TSH均無相關(guān)性(均P>0.05);
6.HT患者外周血PBMC中TLR3、SOCS3mRNA的相對表達量與血清TGAb、TPOAb、FT3、FT4、TSH均無相關(guān)性(均P>0.05);
7.HT組患者外周血中Tfh細胞的比例與血清中自身抗體TGAb水平呈正相關(guān)(r=0.380),與TPOAb水平呈正相關(guān)
6、(r=0.374),與FT3、FT4、TSH均無相關(guān)性(P>0.05);HT組外周血PBMC中Bcl6 mRNA的相對表達量與TGAb、TPOAb均無相關(guān)性(P>0.05);
8. SOCS1與TLR3蛋白在HT患者甲狀腺組織中的表達無相關(guān)性(P>0.05);SOCS3與TLR3蛋白在HT患者甲狀腺組織中的表達無相關(guān)性(P>0.05);
9. HT患者外周血 PBMC中 SOCS1與 TLR3mRNA的表達量呈正相關(guān)
7、(r=0.586);而SOCS3與TLR3 mRNA的表達無相關(guān)性(P>0.05);
10. HT組SOCS1/3 mRNA的相對表達量與Tfh細胞比例均無相關(guān)性(均P>0.05);HT組SOCS1/3 mRNA的相對表達量與Bcl6mRNA表達均無相關(guān)性(均P>0.05);
結(jié)論:
1.HT患者外周血及甲狀腺組織中TLR3、SOCS1/3的表達量較對照組升高,提示TLR3和SOCS1/3都可能參與HT的發(fā)
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