染色體2p24和9p21單核苷酸多態(tài)性與冠心病易感性及嚴重程度的關(guān)聯(lián)研究.pdf

1、背景：冠心病（Coronary artery disease, CAD）作為最常見的慢性心血管疾病，是全世界中老年人群發(fā)病率和死亡率居高不下的原因之一。隨著對CAD的病因和發(fā)病機制的研究，發(fā)現(xiàn)遺傳因素在CAD的發(fā)病中起不容忽視的作用。然而在CAD發(fā)病中起決定作用的遺傳因子仍不清楚。最新的CAD的全基因組關(guān)聯(lián)分析（Genome wide association studies，GWAS）研究證實染色體2p24和9p21區(qū)域的基因單核苷酸多

2、態(tài)性（Single nucleotide polymorphisms,SNP）與CAD的發(fā)病有顯著性關(guān)聯(lián)。染色體9p21單核苷酸多態(tài)性在不同人種的CAD患病中均已得到驗證。但是染色體2p24與9p21單核苷酸多態(tài)性與中國漢族人群CAD的患病易感性及其嚴重程度是否存在關(guān)聯(lián)仍未闡明。
　　第一部分、染色體2p24單核苷酸多態(tài)性與冠心病易感性的關(guān)聯(lián)研究
　　目的：通過研究重慶地區(qū)漢族人群CAD組和對照（Control）組中染色體2

3、p24區(qū)域中的rs12617744、rs2278528、rs7594214、rs3731661和rs721932位點的單核苷酸多態(tài)性及其等位基因分布頻率，探索染色體2p24基因多態(tài)性與CAD的患病易感性的關(guān)系，以期發(fā)現(xiàn)CAD的預(yù)防、診治的新靶點。
　　方法：
　　1.隨機選取符合診斷標準的CAD患者976例作為病例（CAD）組，同期選擇同社區(qū)的非CAD人群935例作為對照（Control）組。
　　2.提取外周全血細胞

4、基因組DNA，應(yīng)用Sequenom MassArray系統(tǒng)對2p24染色體上的rs12617744、rs2278528、rs7594214、rs3731661、rs721932共5個SNP位點進行基因型檢測。研究對象的基本情況、等位基因在各組間的頻率、基因型的分布與CAD及其危險因素的關(guān)聯(lián)性分析均采用SPSS19.0統(tǒng)計軟件進行；采用Haploview軟件進行連鎖不平衡分析；采用SHEsis軟件分析單倍型與CAD的關(guān)系。
　　結(jié)果

5、：
　　1.CAD組和Control組之間的空腹血糖（Fasting blood glucose,FBG)、收縮壓(Systolic blood pressure,SBP)、舒張壓(Diastolic Blood Pressure,DBP)、總膽固醇(Total cholesterol,TC)、血漿低密度脂蛋白(Low density lipoprotein,LDL)和白細胞計數(shù)(White blood cell count,WB

6、C)存在顯著差異。兩組之間的年齡、性別、體重指數(shù)(Body mass index,BMI)和甘油三酯水平(Triglyceride,TG)均未見明顯差異。
　　2.Rs721932位點基因型CG在CAD組中的頻率為36.6％，在Control組中的頻率為42.8%，統(tǒng)計學(xué)分析顯示兩組間的CG基因型的分布有顯著性差異（P＜0.05），提示染色體2p24上的rs721932的CG基因型能降低CAD的發(fā)病風(fēng)險。
　　按照年齡分層分

7、析顯示，在早發(fā)CAD組，rs3731661等位基因A在CAD組中的頻率為32.2%，而在Control組中的頻率為23.8%，提示rs3731661的等位基因A增加CAD的患病風(fēng)險；在遲發(fā)CAD組，rs721932的CG基因型的頻率顯著低于Control組，rs7594214的CC基因型在CAD組中的頻率顯著高于Control組（P＜0.05）。
　　按照性別分層分析發(fā)現(xiàn)，在男性CAD組中，rs721932的CG基因型的頻率顯著低

8、于Control組，rs12617744的AA基因型的頻率也顯著低于Control組，提示rs721932的CG與rs12617744的AA基因型能降低CAD的患病風(fēng)險。在女性CAD組中，rs721932的CG基因型與rs2278528的GC基因型能降低CAD的患病風(fēng)險。
　　在心肌梗死（Myocardial infraction,MI）組的分析中發(fā)現(xiàn)，rs721932的CG基因型在兩組間的分布有差異（P＜0.05），提示rs72

9、1932的CG基因型能顯著降低心肌梗死的發(fā)生；rs12617744的AT基因型在兩組間的分布差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），提示rs12617744的AT基因型可增加心肌梗死的患病風(fēng)險。
　　3.對Control組人群的臨床指標進行分析發(fā)現(xiàn)，rs12617744位點的基因型和高密度脂蛋白(High density lipoprotein,HDL）、空腹血糖（Fasting blood glucose,FBG）有關(guān)聯(lián)。Rs7594

10、214位點的基因型與體重指數(shù)（Body mass index,BMI）、WBC有關(guān)系。Rs3731661位點的基因型與TC水平有關(guān)聯(lián)。Rs721932位點與HDL、SBP水平有顯著關(guān)聯(lián)性。提示rs12617744、rs7594214、rs3731661、rs721932位點與TC、HDL、FBG、SBP、BMI、WBC等CAD的危險因素有關(guān)聯(lián)性。
　　第二部分、染色體2p24和9p21單核苷酸多態(tài)性與冠心病嚴重程度的關(guān)聯(lián)研究

11、>　　目的：在重慶地區(qū)的CAD患者中篩選出405例接受過冠脈造影術(shù)（Coronary angiography,CAG）檢查或治療的患者進行染色體2p24基因多態(tài)性分析，研究染色體2p24基因多態(tài)性對CAD的嚴重程度的影響。對武漢499例接受過冠脈造影術(shù)的患者進行染色體9p21基因多態(tài)性研究，分析染色體9p21基因多態(tài)性與CAD嚴重程度的關(guān)系。探索染色體2p24和9p21基因多態(tài)性位點對CAD嚴重程度的影響。
　　方法：
　　

12、1.選擇在重慶市五所醫(yī)院擬診為“冠心病”，并接受過冠脈造影術(shù)檢查或治療的患者405例。同時在CAD組中選擇明確診斷出CAD類型的患者483例，按照穩(wěn)定性心絞痛（Stable angina pectoris,SAP）、不穩(wěn)定性心絞痛（Unstable angina pectoris,UAP）和心肌梗死（Myocardial infarction,MI）進行分組。另選擇在武漢市三所醫(yī)院接受過冠脈造影術(shù)檢查或治療的患者499例納入研究。

13、>　　2.所有的冠狀動脈造影術(shù)均在各院的導(dǎo)管室由專科醫(yī)生操作，采用Judkins方法，經(jīng)多體位投照完成。所有患者的冠脈造影結(jié)果均由至少兩位經(jīng)驗豐富的心血管內(nèi)科醫(yī)師進行判讀，并對其結(jié)果進行Gensini評分。
　　3.提取外周全血細胞基因組DNA，應(yīng)用Sequenom MassArray系統(tǒng)對重慶市的405例CAG人群進行染色體2p24區(qū)域的基因分型，對武漢市的499例CAG人群進行染色體9p21的基因分型。等位基因頻率、基因型分布

14、與CAD嚴重程度的分析采用SPSS19.0統(tǒng)計軟件進行。
　　結(jié)果：
　　1.對染色體2p24區(qū)域的SNP與CAD嚴重程度的分析發(fā)現(xiàn)，在不同的病變部位中，rs7594214位點三種不同的基因型在左主干(LM)病變中的分布差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。Rs12617744的三種基因型在左回旋支(LCX)病變中的分布有顯著差異（P＜0.05）。染色體2p24基因型及等位基因頻率在病變支數(shù)分組中的未見明顯差異（P＞0.05)

15、）。
　　2.對Control組、SAP、UAP和MI四組進行趨勢檢驗分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，rs721932的等位基因G在四組中的分布頻率有差異（P＜0.05），提示rs721932的SNP與CAD的嚴重程度有關(guān)系。
　　3.對染色體9p21區(qū)域的SNP與CAD嚴重程度進行分析，在病變支數(shù)的分析中發(fā)現(xiàn)，rs2383207的危險基因劑量與2支病變和3支病變有關(guān)聯(lián)(P=2.0×10-3,1.9×10-4)。
　　4.隨著rs23

16、83207危險基因劑量的增加，左主干病變（Left main artery disease,LM)、左前降支病變（Left anterior descending artery disease,LAD)、右冠病變（Right coronary artery disease,RCA)和(Left circumflex disease,LCX)病變在CAG組人群中所占的比例也有所增加。Rs2383207位點的危險等位基因G的頻率與Gensi

17、ni評分有明顯關(guān)系（P＜0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.本研究發(fā)現(xiàn)，rs721932位點的CG基因型能降低CAD的患病風(fēng)險，攜帶rs721932位點的CG基因型的人群不易患CAD。
　　2.分層分析發(fā)現(xiàn)，rs3731661的等位基因A可增加早發(fā)CAD的患病風(fēng)險。Rs721932的CG基因型在遲發(fā)CAD組、男性CAD和女性CAD組中均能降低CAD的患病風(fēng)險，男性rs7594214的CC基因型攜帶者易患CAD。rs126

18、17744的AA基因型在男性CAD患病中起保護作用；和rs2278528的GC基因型能降低女性CAD的患病風(fēng)險。
　　3.本研究還發(fā)現(xiàn)，rs721932的CG基因型能顯著降低MI的發(fā)??；rs12617744的AT基因型的攜帶者容易患心肌梗死。
　　4.血生化指標分析發(fā)現(xiàn)，rs12617744、rs7594214、rs3731661、rs721932位點基因多態(tài)性與TC、HDL、FBG、SBP、BMI、WBC等CAD的危險因素