獨一味乙醇提取物對人黏液表皮樣癌MEC-1細胞株增殖的影響及其機制研究.pdf

1、目的：
　　探討研究獨一味乙醇提取物（Ethanolic Extracts of Lamiophlomis Rotate,EELR）對人黏液表皮樣癌MEC-1細胞株增殖抑制、凋亡的影響；并初步探討分子機制。
　　方法：
　　采用磺酰羅丹明B（Sulforhodamine B，SRB）比色法測定細胞活力、細胞克隆形成實驗檢測細胞增殖率；采用流式細胞儀術(shù)檢測EELR對MEC-1細胞周期阻滯情況、Hoechst33258/P

2、I熒光染色、流式細胞儀術(shù)檢測EELR對MEC-1細胞的凋亡率，采用蛋白質(zhì)免疫印跡試驗（Western Blot）檢測凋亡相關(guān)蛋白表達。
　　結(jié)果：
　　1.不同濃度的EELR呈時間和劑量依賴性抑制MEC-1細胞增殖；并且連續(xù)7d內(nèi)檢測EELR對MEC-1細胞的增殖均有明顯的抑制效果。
　　2.不同濃度的EELR作用于MEC-1細胞48h后，流式細胞術(shù)檢測：MEC-1細胞凋亡率有明顯的差異，細胞周期發(fā)生改變，且阻滯在G2

3、/M期。
　　3.Hoechst/PI熒光染色后示：在同一視野范圍內(nèi)，隨著EELR藥物濃度的增加，細胞總數(shù)呈負相關(guān)，而凋亡、壞死細胞比例呈正相關(guān)。
　　4.當EELR藥物濃度=100μg/mL時，對張氏肝細胞系抑制作用不明顯，且與空白對照組無明顯差異（P＞0.05）。
　　5.不同濃度的EELR對黏液表皮樣癌MEC-1細胞株的克隆形成能力，均有顯著的抑制效果（P＜0.01）。
　　6.Western Blot檢測