長鏈非編碼RNA SPRY4-IT1對髓母細胞瘤細胞株增殖及侵襲轉(zhuǎn)移的影響.pdf

1、髓母細胞瘤是兒童小腦最常見的侵襲性胚胎性腫瘤,約占兒童小腦腫瘤的40％，兒童顱內(nèi)腫瘤的20％[1]。由于髓母細胞瘤對放、化療敏感,腫瘤手術(shù)切除后行放、化療仍是髓母細胞瘤主要的治療方法,但過度放、化療對兒童聽力、認知能力、內(nèi)分泌及血管系統(tǒng)造成嚴重損害并有繼發(fā)性惡性腫瘤的副作用,腫瘤遠期生存率及生活質(zhì)量較差[2][3]，5年無進展長期生存率不到70%[4]。因此，深入探討髓母細胞瘤發(fā)生發(fā)展的分子機制對髓母細胞瘤的早期診治及改善預(yù)后具有重要的

2、意義。
　　在真核生物體內(nèi)存在著大量的無編碼蛋白能力的RNA，這些不具有編碼蛋白能力的RNA中，其核苷酸鏈長度＞200nt為長鏈非編碼RNA[5](Long non-coding RNA，LncRNA)。近年來關(guān)于LncRNA的研究進展迅速，SPRY4-IT1(基因號AK024556)作為LncRNA家族的一員也受到越來越多的關(guān)注，其在膠質(zhì)瘤中高表達與膠質(zhì)瘤細胞的增殖、遷移密切相關(guān)[6]，但SPRY4-IT1是否在髓母細胞瘤中也發(fā)

3、揮著相似作用，目前尚未見相關(guān)報道。本研究旨在體外觀察SPRY4-IT1對髓母細胞瘤細胞株生物學(xué)功能的影響，為其用于臨床治療髓母細胞瘤提供實驗依據(jù)。
　　目的：
　　探討長鏈非編碼RNA SPRY4-IT1對髓母細胞瘤細胞株增殖及侵襲轉(zhuǎn)移的影響。
　　方法：
　　髓母細胞瘤Daoy細胞分為對照組和si-SPRY4-IT1組，分別利用脂質(zhì)體Lipofectamine2000將陰性對照熒光序列和SPRY4-IT1-si

4、RNA轉(zhuǎn)入細胞中，采用Real-time PCR檢測轉(zhuǎn)染后各組細胞中SPRY4-IT1的表達情況，CCK-8實驗及平板克隆形成實驗檢測細胞增殖能力的變化，以細胞Transwell實驗檢測細胞侵襲、遷移能力的變化，Western blot檢測SPRY4-IT1對基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）-2和MMP-9蛋白的影響。
　　結(jié)果：
　　si-SPRY4-IT1組SPRY4-IT1 mRNA表達水平、細胞體外增殖能力、細胞侵襲、遷移能