基于SERS技術(shù)的柑橘多甲氧基黃酮高效檢測研究.pdf

1、本研究以柑橘果皮中特有的生物活性成分多甲氧基黃酮(PMFs)為研究對象，以表面增強(qiáng)拉曼散射技術(shù)(SERS)為技術(shù)手段，通過對表面增強(qiáng)拉曼散射技術(shù)檢測條件的優(yōu)化以獲得最強(qiáng)拉曼散射信號，提高食品功效成分PMFs的檢測靈敏度;系統(tǒng)闡述TLC-SERS聯(lián)用技術(shù)在分離檢測食品功效成分PMFs的規(guī)律，同時(shí)探索采用TLC-SERS聯(lián)用技術(shù)提高PMFs在復(fù)雜樣品中的檢出率，統(tǒng)籌優(yōu)化建立高效檢測復(fù)雜樣品中PMFs的SERS方法;通過細(xì)致闡明SERS譜圖與

2、PMFs化學(xué)結(jié)構(gòu)特征的相關(guān)性，構(gòu)建SERS條形碼，并結(jié)合定量構(gòu)效關(guān)系研究，建立SERS條形碼與生物活性之間的關(guān)聯(lián)關(guān)系，實(shí)現(xiàn)SERS方法同時(shí)識別食品功效成分的化學(xué)結(jié)構(gòu)和生物活性，進(jìn)一步增強(qiáng)SERS在實(shí)際應(yīng)用中的檢測功能，為食品乃至其他復(fù)雜基質(zhì)中特定化學(xué)成分的高效、快速檢測提供重要的科學(xué)指導(dǎo)。
　　主要研究結(jié)果如下:
　　(1)以川陳皮素為例獲得的SERS最佳檢測條件為:激光器波長514 nm，掃描時(shí)間10s，功率3.0 mW，

3、銀枝狀納米顆?；椎姆磻?yīng)時(shí)間20 s。同時(shí)羥基化多甲氧基黃酮對檢測條件的響應(yīng)行為與全甲氧基黃酮基本一致，通過系列條件的優(yōu)化，完善了多甲氧基黃酮SERS檢測方法，不僅為后續(xù)建立系統(tǒng)的系列多甲氧基黃酮SERS檢測方法提供參考，也為進(jìn)一步擴(kuò)大和推動SERS技術(shù)在食品檢測中的使用和發(fā)展奠定基礎(chǔ)。
　　(2) TLC-SERS聯(lián)用實(shí)現(xiàn)多種PMFs同時(shí)高效分離檢測:對12種PMFs類似物的TLC分離效果及其在紫外熒光(254nm和365 nm

4、)和染色（香草醛-硫酸和三氯化鐵-鹽酸）情況進(jìn)行詳細(xì)分析確定最佳2D-TLC洗脫條件（二氯甲烷/甲醇20∶1和石油醚/丙酮6∶4），此條件下的分離效果優(yōu)于HPLC，12種PMFs全部得到良好分離，同時(shí)進(jìn)一步與SERS技術(shù)聯(lián)用，實(shí)現(xiàn)多種PMFS的同時(shí)分離和檢測，為食品復(fù)雜基質(zhì)中功效成分的高效提取分離和檢測奠定基礎(chǔ)。
　　(3)柑橘來源功效成分化學(xué)結(jié)構(gòu)和生物活性的同時(shí)識別:對9種柑橘來源功效成分進(jìn)行SERS檢測及系統(tǒng)譜圖分析，結(jié)合相關(guān)

5、數(shù)據(jù)計(jì)算構(gòu)建可識別柑橘功效成分化學(xué)結(jié)構(gòu)的SERS條形碼;結(jié)合抗氧化活性測試結(jié)果建立SERS條形碼特征峰與生物活性的關(guān)系，賦予SERS條形碼識別生物活性的能力，從而采用SERS條形碼創(chuàng)新性地實(shí)現(xiàn)柑橘功效成分化學(xué)結(jié)構(gòu)和生物活性同時(shí)識別。另外，SERS條形碼在柑橘功效成分定量分析也具有很大的潛力，川陳皮素類似物的LOQ值低至40 ng，而橘皮素類似物、橙皮苷、辛弗林和β-胡蘿卜素的LOQ值低至60 ng。創(chuàng)新性地利用SERS技術(shù)實(shí)現(xiàn)食品中功效