矽肺患者自身免疫相關指標水平及與臨床病情關系的研究.pdf

1、背景及目的：塵肺是我國頭號職業(yè)病，是指在職業(yè)活動中長期吸入生產性礦物性粉塵并在肺內潴留而引起的以肺組織彌漫性纖維化為主的疾病。其中，又以矽肺對工人健康危害最為嚴重，其病例數占塵肺總病例逾半。因矽肺患者人數眾多，對工人健康危害大，矽肺的發(fā)病機制一直是國內外職業(yè)衛(wèi)生研究人員關注的重點。研究發(fā)現，吸入體內的粉塵顆?？梢约せ钭陨砻庖呒毎麖亩閷Оㄗ陨砻庖卟≡趦鹊脑S多免疫異常。本研究通過分析矽肺患者血清中與自身免疫情況相關的類風濕因子（RF）、

2、抗雙鏈 DNA抗體（抗ds-DNA抗體）、叉頭狀轉錄因子3（Foxp3）、維甲酸相關孤核受體γt（RORγt）、CD4+CD25+調節(jié)性T淋巴細胞（CD4+CD25+regulatory T cells，Tregs）、輔助性T細胞17（T help cell17, Th17）、白介素17（IL-17）等免疫指標的表達水平和抗核抗體(ANA)的異常率，及其與矽肺患者肺部病變程度的相關性。初步探討矽肺患者免疫狀況及其與矽肺患者自身肺部病變程

3、度的相關性。嘗試找出能協(xié)助反映矽肺患者肺部實際病變情況的客觀指標，為輔佐臨床診斷、病情判斷、改善治療方案及療效判斷等提供理論參考依據。
　　方法：
　　1.研究對象
　　分別以120例矽肺患者為矽肺組，90例無職業(yè)危害因素接觸的醫(yī)務工作者及辦公室文職人員為健康對照組，收集兩組人員的年齡、性別、吸煙習慣、既往疾病史等一般情況。收集矽肺組的工種、工齡、矽肺診斷期別、總體密集度。
　　2.實驗方法
　　2.1 血

4、樣標本收集收集矽肺組患者入院后第2天晨起空腹全血5ml/10ml，收集健康對照組晨起空腹全血5ml/10ml，經離心后留取血清備檢。
　　2.2 采用免疫比濁法檢測類風濕因子表達水平、酶聯(lián)免疫吸附法檢測抗ds-DNA抗體、間接免疫熒光法檢測ANA滴度、Real-time PCR法測定轉錄因子Foxp3及RORγt表達水平、流式細胞計量法測定Treg、Th17細胞表達水平、ELISA方法測定血清IL-17細胞因子水平。
　　2

5、.3 矽肺組入院后第二日進行血氣分析檢測，收集血氣分析指標二氧化碳分壓（PCO2）、氧分壓（PO2）檢查結果。
　　2.4 矽肺組入院后第二日進行肺通氣功能檢測，收集相關檢測指標結果。檢測項目包括用力肺活量( FVC)、第1秒用力呼氣容量(FEV1)、1秒率(FEV1％)、最高呼氣流量(PEF)、最大呼氣期流量(FEF25～75%)；用力呼氣25%肺活量的瞬間流量( FEF25%)、用力呼氣50%肺活量的瞬間流量( FEF50%)

6、、用力呼氣75%肺活量的瞬間流量( FEF75%)、第1秒用力呼氣容量占肺活量百分比（FEV1/VC%）。
　　3.統(tǒng)計方法
　　采用SPSS19.0軟件進行統(tǒng)計分析，所有計量資料均進行正態(tài)性檢驗（K-S檢驗），符合正態(tài)分布用xs形式描述，不符合正態(tài)分布的計量資料采用M（P25，P75）描述，兩組之間比較采用兩樣本的t檢驗或兩樣本的秩和檢驗，多組之間比較采用方差分析或多樣本比較的秩和檢驗；率比較采用χ2檢驗或Fisher's

7、確切概率法；相關性分析采用Pearson相關分析或Spearman等級相關分析。
　　結果：
　　1、矽肺組ANA異常率高于健康對照組（P＜0.05），但在不同的矽塵接觸時間、矽肺分期、總體密集度、肺通氣功能及血氣分析指標氧分壓正常與否間的異常率比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。
　　2、矽肺組與健康對照組血清中的RF、抗ds-DNA抗體表達水平均在檢測正常范圍內，兩組間的RF、ds-DNA抗體表達水平比較，差異

8、無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；不同矽肺分期、總體密集度之間RF、抗ds-DNA抗體表達水平無統(tǒng)計學差異（P＞0.05）；矽肺患者RF表達水平與年齡存在弱的正相關（rs為0.227，P＜0.05），與矽塵接觸時間、肺通氣功能實測值占預計值的百分比、血二氧化碳分壓、血氧分壓均不存在相關關系（P＞0.05）；抗ds-DNA抗體表達水平與年齡、矽塵接觸時間、肺通氣功能實測值占預計值的百分比、血二氧化碳分壓、血氧分壓均不存在相關關系（P＞0.05

9、）。
　　3、矽肺組血清中的轉錄因子Foxp3及RORγt表達水平高于健康對照組（P＜0.05）；矽肺叁期患者血清轉錄因子Foxp3表達水平高于矽肺壹期、矽肺貳期患者（P＜0.05）；矽肺叁期患者血清轉錄因子RORγt高于矽肺壹期患者（P＜0.05）；矽肺壹期、貳期間Foxp3及RORγt表達水平比較無統(tǒng)計學差異（P＞0.05）；矽肺貳期與叁期患者間轉錄因子RORγt表達水平比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。不同總體密集度矽

10、肺患者間Foxp3及RORγt表達水平比較無統(tǒng)計學差異（P＞0.05）；Foxp3及RORγt表達水平與矽肺患者年齡、矽塵接觸時間、肺通氣功能、血氣分析均不存在相關關系（P＞0.05）。
　　4、矽肺組血清中的Treg、Th17細胞表達水平高于健康對照組（P＜0.05）；矽肺壹期與貳期+叁期兩組間患者的血清Treg、Th17細胞表達水平比較，無統(tǒng)計學差異（P＞0.05）；矽肺患者Treg細胞表達水平與矽塵接觸時間存在負相關（rs為

11、-0.390，P＜0.05），與肺通氣功能FVC、FEV1實測值占預計值的百分比存在正相關（rs分別為0.487、0.460，P＜0.05），與年齡、血氧分壓、血二氧化碳分壓、肺通氣功能其他指標的實測值占預計值的百分比不存在相關關系（P＞0.05）；矽肺患者Th17細胞表達水平與年齡、矽塵接觸時間、肺通氣功能、血氣分析均不存在相關關系（P＞0.05）。
　　5、矽肺組血清中的IL-17表達水平高于健康對照組（P＜0.05）；不同矽

12、肺分期、總體密集度之間IL-17表達水平無統(tǒng)計學差異（P＞0.05）；IL-17表達水平與矽肺患者年齡、矽塵接觸時間、肺通氣功能、血氣分析均不存在相關關系（P＞0.05）。
　　結論：
　　1、部分矽肺患者出現機體免疫紊亂，可出現自身免疫抗體；
　　2、矽肺患者ANA異常率高于正常人，但目前未發(fā)現其與矽肺肺部病變程度存在相關性；
　　3、矽肺患者RF值、抗ds-DNA抗體水平均在正常范圍內，抗ds-DNA抗體水平

13、有隨矽肺分期增加而升高的趨勢，但與正常人群比較無統(tǒng)計學差異；且目前未發(fā)現上述兩者與矽肺肺部病變程度存在相關性。
　　4、矽肺患者Treg、Th17細胞及其關鍵轉錄因子Foxp3、RORγt和細胞因子IL-17的表達水平均高于正常人群，且Foxp3、RORγt和IL-17的表達水平表現出隨矽肺分期增加而升高的趨勢，說明Treg、Th17及其關鍵轉錄因子、細胞因子參與了矽肺患者的免疫紊亂，可能與矽肺嚴重程度存在關聯(lián)。
　　5、目