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文檔簡介
1、目的:
探討ENO1在HBV相關(guān)原發(fā)性肝癌中的表達(dá)及其對(duì)肝癌細(xì)胞生物學(xué)活性的影響及可能機(jī)制。
方法:
利用qRT-PCR、Western blot、ELISA技術(shù)對(duì)ENO1在肝癌及癌旁組織、肝癌細(xì)胞及正常肝細(xì)胞、血清中的表達(dá)進(jìn)行差異性分析。采用siRNA干擾技術(shù)對(duì)HepG2細(xì)胞的ENO1基因進(jìn)行敲減,然后利用CCK-8、克隆形成、transwell實(shí)驗(yàn)技術(shù)檢測(cè) HepG2細(xì)胞增殖、遷移、侵襲能力的變化,實(shí)時(shí)
2、定量PCR檢測(cè)Notch信號(hào)通路下游靶基因HEY1,HES1,HES5的差異性表達(dá),Western blot技術(shù)檢測(cè)NICD及EMT相關(guān)蛋白snail、slug、β-Catenin,E-Cadherin和Vimentin的差異性表達(dá)。
結(jié)果:
ENO1在 HBV相關(guān)肝癌組織和HepG2.215細(xì)胞系中明顯高表達(dá)。下調(diào) ENO1的表達(dá)明顯降低肝癌細(xì)胞的增殖、克隆形成、遷移、侵襲能力。進(jìn)一步的機(jī)制研究表明下調(diào)ENO1的表
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