NICD及COX-2在胃癌組織中的表達(dá)及臨床生物學(xué)意義.pdf

1、目的:
　　 Notch信號(hào)是進(jìn)化中高度保守的通道,研究發(fā)現(xiàn)Notchl具有促癌和抑癌雙重作用,在腫瘤發(fā)生機(jī)制中作用復(fù)雜。NICD(Notch Intracellular Domain,Notch胞內(nèi)區(qū)域)是Notchl的活化形式,經(jīng)轉(zhuǎn)移至胞核,進(jìn)而激活靶基因而產(chǎn)生作用。國(guó)內(nèi)外學(xué)者研究Notch1較多,而研究NICD較少,目前尚未見其在胃癌組織中的表達(dá)以及與臨床病理特征關(guān)系的相關(guān)報(bào)道。環(huán)氧化酶(COX)是花生四烯酸(AA)合成前

2、列腺素(PG)的限速酶,包括COX-1和COX-2兩種亞型。已知COX-2可通過(guò)影響細(xì)胞增殖和凋亡失去平衡而促進(jìn)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展,在胃癌發(fā)生中也有重要作用。有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)通過(guò)NICD、CBF1(C promoter-binding factor1,C啟動(dòng)子結(jié)合因子1)與COX-2啟動(dòng)子(COX-2 promoter)結(jié)合可提高胃癌細(xì)胞株COX-2的表達(dá),提示NICD與COX-2存在某種聯(lián)系。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)免疫組化法(IHC)檢測(cè)NICD與C

3、OX-2在胃癌組織中的表達(dá)差異,并對(duì)患者進(jìn)行術(shù)后門診及電話隨訪,進(jìn)一步探討兩者的聯(lián)系以及在臨床生物學(xué)中的意義。
　　 方法:
　　 1.收集溫州醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院2007～2009年間經(jīng)手術(shù)并病理證實(shí)的110例胃癌患者的術(shù)后癌組織標(biāo)本及同期27例慢性淺表性胃炎、19例胃癌前狀態(tài)患者的胃鏡下活檢組織標(biāo)本,經(jīng)1096甲醛固定,常規(guī)石蠟包埋,4μm連續(xù)切片,敷貼于1％多聚賴氨酸處理的載玻片上。
　　 2.采用免疫組織化

4、學(xué)染色方法(SP法)檢測(cè)各組織標(biāo)本中的NICD、COX-2的表達(dá)。NICD染色結(jié)果以陽(yáng)性細(xì)胞所占百分比表示,即低倍鏡下(放大400倍)隨機(jī)選取10個(gè)視野,每個(gè)視野計(jì)數(shù)100個(gè)細(xì)胞,取其均值；COX-2的表達(dá)結(jié)果采用Image-ProPlus6.0軟件分析,以累計(jì)光密度為指標(biāo),其數(shù)值高低反映陽(yáng)性率的高低。
　　 3.根據(jù)NICD、COX-2的表達(dá)差異結(jié)果,分析其與胃癌原發(fā)腫瘤的浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤分化程度等的關(guān)系及分析兩者表

5、達(dá)水平的相互關(guān)系。同期對(duì)胃癌患者進(jìn)行電話隨訪,探討影響胃癌預(yù)后的相關(guān)因素。
　　 4.統(tǒng)計(jì)學(xué)方法:采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件,不同組間比較用χ2檢驗(yàn)分析,因素相關(guān)性分析用Spearman等級(jí)相關(guān)分析,單因素分析用Kaplan-Meier曲線、log-rank檢驗(yàn),多因素分析用Cox比例風(fēng)險(xiǎn)回歸模型,P<0.05表示為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果:
　　 1.胃癌組、胃癌前狀態(tài)組、慢性淺表性胃炎組NICD蛋白的

6、陽(yáng)性表達(dá)率分別為65.45％(72/110)、21.06％(4/19)、7.41％(2/27),胃癌組與胃癌前狀態(tài)組、胃癌組與慢性淺表性胃炎組之間的差別均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(結(jié)果分別為χ2=13.191,P<0.01；χ2=29.408,P<0.01)。胃癌前狀態(tài)組和慢性淺表性胃炎組之間的差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=1.831,P>0.05)。
　　 2.胃癌組、胃癌前狀態(tài)組、慢性淺表性胃炎組COX-2蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率分別為76.36％(

7、84/110)、5.26％(1/19)、0％(0/27),胃癌組與胃癌前狀態(tài)組、胃癌組與慢性淺表性胃炎組之間的差別均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(結(jié)果分別為χ2=36.443,P<0.01；χ2=53.296,P<0.01)。胃癌前狀態(tài)組和慢性淺表性胃炎組之間的差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.032,P>0.05)。
　　 3.NICD和COX-2在胃癌組織中表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.352,P<0.01)。
　　 4.NICD與腫瘤大小、分化

8、程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),與患者的年齡、性別、部位、浸潤(rùn)深度、脈管浸潤(rùn)、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的相關(guān)性均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；COX-2與腫瘤的分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),與患者的年齡、性別、部位、腫瘤大小、浸潤(rùn)深度、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的相關(guān)性無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　 5.NICD陽(yáng)性組2年生存率為52％,陰性組2年生存率約80％；COX-2陽(yáng)性組2年生存率約53％,陰性