HLJ1在結(jié)直腸癌中的表達(dá)及其臨床生物學(xué)意義.pdf

1、目的:人肝臟DnaJ-like蛋白(HLJ1)是熱休克蛋白40分子伴侶家族的成員之一，HLJ1在非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)和肝細(xì)胞癌(HCC)中的作用已經(jīng)有學(xué)者證實(shí)，而其在結(jié)直腸癌(CRC)中的意義目前尚不明確。本文旨在檢測(cè)HLJ1基因及HLJ1蛋白在CRC細(xì)胞株中的表達(dá)，測(cè)定HLJ1蛋白在CRC癌組織、癌旁正常黏膜組織及淋巴結(jié)組織中的表達(dá)，分析HLJ1水平與CRC患者各臨床病理特征間的聯(lián)系，比較不同HLJ1表達(dá)水平患者的存活率差異，從

2、而探討HLJ1在結(jié)直腸癌中的臨床生物學(xué)意義。
　　方法:采用實(shí)時(shí)逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)及蛋白免疫印跡(Western blot)兩種方法分別檢測(cè)5種低轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌細(xì)胞株和2種高轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌細(xì)胞株中HLJ1基因及蛋白表達(dá);免疫組織化學(xué)(IHC)方法檢測(cè)147例CRC患者手術(shù)標(biāo)本的癌組織、癌旁正常黏膜組織及相應(yīng)淋巴結(jié)組織中HLJ1表達(dá);分析HLJ1表達(dá)與CRC患者年齡、性別、腫瘤大小、分化程度、漿膜浸潤(rùn)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、淋

3、巴結(jié)轉(zhuǎn)移率(LNR)、Dukes'分期及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移相應(yīng)臨床病理特征聯(lián)系;采用生存曲線分析比較不同HLJ1表達(dá)水平的結(jié)直腸癌患者生存率差異。結(jié)果:實(shí)時(shí)RT-PCR結(jié)果顯示低轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌細(xì)胞株與高轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌細(xì)胞株相比，HLJ1基因表達(dá)上調(diào)，且表達(dá)增高四倍，Western blot檢測(cè)各細(xì)胞株的HLJ1蛋白水平顯示出同樣結(jié)果:低轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌細(xì)胞株HLJ1蛋白水平明顯高于高轉(zhuǎn)移性細(xì)胞株;147例CRC患者癌組織或者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移性癌組織的HL

4、J1表達(dá)較癌旁正常粘膜明顯降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，并且HLJ1表達(dá)在結(jié)直腸癌組織中伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者較無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者相比顯著降低(P＜0.01)，然而伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的CRC癌組織HLJ1表達(dá)與轉(zhuǎn)移性淋巴結(jié)組織之間沒(méi)有顯著差異（P＞0.05）;另外分析HLJ1表達(dá)與CRC患者各臨床病理特征聯(lián)系顯示HLJ1表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、Dukes，分期及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移密切相關(guān)(P＜0.05），而與年齡、性別、腫瘤大小、分化程度、漿膜浸潤(rùn)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)

5、移率之間未顯示相關(guān)性;此外，Kaplan-Meier生存曲線結(jié)果表明HLJ1高水平的CRC患者遠(yuǎn)期生存率顯著高于HLJ1低水平者(P＜0.05），單一危險(xiǎn)因素分析，HLJ1的表達(dá)、腫瘤分級(jí)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率、Dukes'分期和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移與CRC預(yù)后顯著相關(guān)(P＜0.05），多因素風(fēng)險(xiǎn)分析結(jié)果表明HLJ1的表達(dá)與淋巴轉(zhuǎn)移可能在預(yù)測(cè)CRC患者的總生存期中發(fā)揮作用(P＜0.05）。結(jié)論:HLJ1是一個(gè)強(qiáng)有力的結(jié)直腸癌抑制基因，HLJ1不