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文檔簡介
1、目的:檢測人結(jié)直腸癌組織中DAPK1mRNA及蛋白表達(dá)水平,并初步探討DAPK1的表達(dá)與所取標(biāo)本患者臨床特征間的關(guān)系及其臨床意義。
方法:收集華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬協(xié)和醫(yī)院胃腸外科結(jié)直腸癌手術(shù)標(biāo)本60例(均經(jīng)本院病理科病理確診)。分別提取結(jié)直腸癌組織和癌旁正常組織(距腫瘤邊緣5cm以上)總RNA和蛋白,用RT-PCR法和Western-blot法測定DAPK1mRNA和蛋白在結(jié)直腸癌及癌旁組織中的表達(dá),然后利用影像成像分析
2、法測定DAPK1在結(jié)直腸癌組織和癌旁組織中的半定量值。通過統(tǒng)計學(xué)分析,探討DAPK1表達(dá)與結(jié)直腸癌的不同分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、以及患者其它臨床資料的關(guān)系及其臨床意義。
結(jié)果:1.RT-PCR檢測顯示在60例癌旁組織中,有48例呈DAPK1陽性表達(dá),陽性表達(dá)率為80%(48/60);而在結(jié)直腸癌組織中有14例呈DAPK1陽性表達(dá),陽性率為23.3%(14/60),兩組間陽性率差異存在明顯統(tǒng)計學(xué)意義(x2=38.57,P<0.05)。
3、癌旁正常組織中,DAPK1mRNA表達(dá)平均灰度值為0.56±0.03,明顯高于癌癥組織平均灰度值0.27±0.04,兩組間DAPK1mRNA相對表達(dá)量差異有明顯統(tǒng)計學(xué)意義(t=5.31P<0.05)。
2.Western-blot檢測顯示癌旁組織DAPK1蛋白表達(dá)相對光密度值為0.64±0.04,癌癥組織為0.36±0.03,癌旁組織DAPK1蛋白的表達(dá)明顯高于癌癥組織,兩組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=4.60,P<0.05)。<
4、br> 3.癌癥組織中,DAPK1mRNA及其蛋白在DukesA、B期的表達(dá)明顯高于DukesC、D期,而DukesA、DukesB期間的表達(dá)無明顯差異,二組間的比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義。無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的癌癥組織DAPK1mRNA及其蛋白的表達(dá)均高于有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的癌癥組織(P<0.05)。而在癌旁正常組織中,DAPK1mRNA及其蛋白的表達(dá)與Dukes分期與淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移無相關(guān)性(P>0.05)。
4.DAPK1mRNA及其蛋白的
5、表達(dá)與患者性別、年齡、腫瘤位置、大小的相關(guān)性經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析,各組間表達(dá)無差異。
5.DAPK1mRNA表達(dá)高的組織其蛋白表達(dá)水平相對較高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
結(jié)論:1.DAPK1基因mRNA及蛋白表達(dá)降低可能與結(jié)直腸癌的發(fā)生有關(guān)。
2.DAPK1的表達(dá)異??赡艹霈F(xiàn)在結(jié)直腸癌發(fā)生發(fā)展的早期階段,對結(jié)直腸癌的早期篩查與診斷有一定的臨床價值,此外DAPK1基因可能與結(jié)直腸癌的侵襲與轉(zhuǎn)移有關(guān)。
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