二甲雙胍對糖尿病大鼠FGF19，F(xiàn)GF21和FGFR1的影響.pdf

1、研究目的
　　近年來研究發(fā)現(xiàn)成纖維細(xì)胞生長因子19(FGF19)、成纖維細(xì)胞生長因子21(FGF21)通過與成纖維細(xì)胞生長因子受體(FGFRs)結(jié)合在糖脂代謝中發(fā)揮了重要作用，被認(rèn)為新的代謝激素。此外，研究表明特異性活化纖維細(xì)胞生長因子受體1(FGFR1)可以改善糖脂代謝。二甲雙胍作為臨床一線用藥，主要通過抑制肝糖原輸出和增加外周組織胰島素敏感性發(fā)揮作用。我們研究二甲雙胍干預(yù)前后2型糖尿病模型中血清FGF19、FGF21，胰腺和脂

2、肪組織FGFR1的表達(dá)水平及Akt的磷酸化水平的變化，進(jìn)而探討二甲雙胍新的藥物靶點(diǎn)和器官靶點(diǎn)。
　　研究方法
　　給予8周齡健康雄性Wistar大鼠（n=60只）標(biāo)準(zhǔn)飲食，隨機(jī)分為正常對照組(Controlgroup，Con)(n=20)和高脂飲食組(highfatdietgroup，HFD)(n=40)，分別普通飼料和高脂飼料喂養(yǎng)。6w后，將HFD組大鼠腹腔注射鏈脲佐菌素(STZ)(35mg/kg)誘導(dǎo)糖尿病模型。誘導(dǎo)成模

3、的大鼠隨機(jī)分為DM組和DM+METF組，DM+METF大鼠給予二甲雙胍（500mg.kg-1.d-1）。在24周末檢測血清生化學(xué)指標(biāo)，酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測FGF19和FGF21水平。蛋白免疫印跡(WB)，免疫組化(IHC)檢測組織FGFR1的表達(dá)水平。WB檢測總的Akt(totalAkt)及磷酸化的Akt(p-Akt)的變化。三組之間比較采用one-wayANOVA。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果
　　1.各組大鼠一般觀察指標(biāo)的

4、比較
　　糖尿病組(DM)大鼠在高脂飲食/STZ造模成功后，進(jìn)食量和飲水量及體重顯著增加，高于正常對照組。二甲雙胍干預(yù)糖尿病組(DM+METF)大鼠＼的進(jìn)食量，飲食量和體重也較正常組顯著增加，但是均明顯低于糖尿病組大鼠，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　2.各組大鼠的血清生化學(xué)指標(biāo)比較
　　在實(shí)驗(yàn)?zāi)?，糖尿病組(DM)大鼠的糖脂和膽汁酸代謝紊亂。2型糖尿病大鼠的糖耐量實(shí)驗(yàn)提示胰島素釋放高峰延遲，整體胰島素曲線低平

5、，兩小時(shí)末，胰島素水平仍高于正常對照組。二甲雙胍干預(yù)糖尿病組大鼠的FBG、FIN、TC、TG、LDL均較DM組大鼠降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　3.各組大鼠FGF19，F(xiàn)GF21，F(xiàn)GFR1和Akt磷酸化水平比較
　　與正常對照組(Con)組大鼠比較，糖尿病組(DM)組大鼠血清FGF19水平顯著降低（P＜0.05);FGF21水平顯著升高(P＜0.05);脂肪組織和胰腺組織FGFR1表達(dá)異常增高，Akt的磷酸化水平（p-A

6、kt/total-Akt）顯著降低（P＜0.05）。二甲雙胍干預(yù)大鼠的血清FGF21較DM組大鼠明顯升高(P＜0.05)，而FGF19較DM組大鼠明顯減低(P＜0.05)。此外，胰腺FGFR1的表達(dá)水平接近正常組水平，而脂肪組織的FGFR1仍高于正常對照組和糖尿病組;兩組織的Akt的磷酸化水平（p-Akt/total-Akt）明顯高于糖尿病組大鼠。
　　結(jié)論
　　1.高脂飲食和小劑量鏈脲佐菌素(35mg/kg)可以誘導(dǎo)2型糖

7、尿病模型，2型糖尿病大鼠的血脂和血糖代謝紊亂。
　　2.二甲雙胍可以通過抑制攝食量改善體重。此外，還可以使膽固醇向膽汁酸轉(zhuǎn)化增多，并促進(jìn)膽汁排泄。
　　3.2型糖尿病大鼠FGF19和FGF21代謝出現(xiàn)紊亂，脂肪和胰腺組織FGFR1及Akt通路損傷。
　　4.二甲雙胍干預(yù)可以使得DM大鼠的FGF19進(jìn)一步降低，F(xiàn)GF21升高。但是可以逆轉(zhuǎn)Akt磷酸化水平的降低，這可能是通過FGFR1作用于Akt通路從而改善胰腺及脂肪組織