2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:通過高脂飲食(high-fat diet,HFD)誘導(dǎo)的肥胖大鼠模型和3T3-L1小鼠前脂肪細(xì)胞模型,研究牛蒡子苷元(Arctigenin)對降低體重、下調(diào)血脂的作用,以及對脂肪細(xì)胞增殖分化、脂肪合成分解代謝的影響;并進(jìn)一步探討牛蒡子苷元調(diào)控脂肪代謝的作用機(jī)制。
  方法:(1)復(fù)制HFD誘導(dǎo)的肥胖大鼠模型,隨機(jī)分為模型對照組、牛蒡子苷元低劑量組、牛蒡子苷元高劑量組和陽性藥物(阿托伐他?。┙M,另以普通飼料喂養(yǎng)的大鼠為正常對照

2、組,每組8只。各組藥物干預(yù)后,記錄體重和臟器重量變化,測定血脂水平,切片觀察肝臟細(xì)胞和脂肪細(xì)胞病理改變。(2)采用不同濃度牛蒡子苷元(12.5-100μmol/L)作用對數(shù)生長期的3T3-L1前脂肪細(xì)胞48 h,CCK8法檢測細(xì)胞增殖情況。誘導(dǎo)3T3-L1前脂肪細(xì)胞成脂分化,在分化期間加入牛蒡子苷元(25-100μmol/L)處理細(xì)胞8天,通過油紅O染色檢測脂肪細(xì)胞分化程度和脂質(zhì)合成,實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測分化調(diào)控轉(zhuǎn)錄因子及其靶基因的

3、表達(dá)。(3)3T3-L1前脂肪細(xì)胞被誘導(dǎo)分化為成熟脂肪細(xì)胞后,加入不同濃度牛蒡子苷元作用48 h,測定細(xì)胞總脂質(zhì)、甘油三酯和甘油含量,實(shí)時(shí)熒光定量PCR法和Western印跡法檢測腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)信號通路蛋白表達(dá)水平及活化情況。
  結(jié)果:(1)動物實(shí)驗(yàn)中,與模型對照組相比,牛蒡子苷元高劑量治療組體重減輕,肝指數(shù)及附睪脂肪重量降低,血清總膽固醇(TCHO)、甘油三酯(TG)顯著下調(diào),高密度脂蛋白膽固醇(HDL-L)明

4、顯升高,肝臟脂肪變性明顯減輕。(2)牛蒡子苷元在12.5-100μmol/L濃度范圍對3T3-L1前脂肪細(xì)胞的增殖活性無顯著性影響,但顯著抑制細(xì)胞成脂分化。在25、50、100μmol/L濃度下,3T3-L1前脂肪細(xì)胞的成脂分化率分別為對照組的78.31%、44.85%、17.58%。(3)牛蒡子苷元在25-100μmol/L濃度范圍內(nèi)顯著抑制成熟脂肪細(xì)胞總脂質(zhì)和TG合成,抑制甘油釋放。(4)在脂肪細(xì)胞分化過程中,牛蒡子苷元?jiǎng)┝恳蕾囆悦?/p>

5、顯下調(diào)脂肪細(xì)胞分化調(diào)控轉(zhuǎn)錄因子C/EBPα、PPARγ、SREBP-1c以及其相應(yīng)的靶基因LPL、AP2、FAS、ACC、Adiponectin、LXRmRNA水平。(5)牛蒡子苷元顯著上調(diào)3T3-L1成熟脂肪細(xì)胞AMPK磷酸化水平,提示AMPK信號通路被激活。信號通路下游與脂質(zhì)生成相關(guān)的基因和蛋白(包括ACC、FAS、LPL、PPARγ和C/EBPα)以及與脂肪水解相關(guān)的基因(HSL)的表達(dá)水平下調(diào)。同時(shí),AMPK的激活也導(dǎo)致ACC磷

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