替米沙坦對(duì)1型糖尿病大鼠睪丸脂聯(lián)素及其受體表達(dá)的影響.pdf

1、目的：
　　通過(guò)觀察替米沙坦（ telmisartan）對(duì)1型糖尿?。?T1DM）大鼠睪丸脂聯(lián)素（Adiponectin,APN）、脂聯(lián)素受體（AdipoR）和腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）和蛋白激酶B/內(nèi)皮性一氧化氮合酶/一氧化氮（Akt/eNOS/NO）表達(dá)的影響，探討替米沙坦如何保護(hù)T1DM大鼠睪丸。
　　方法：
　　雄性SD大鼠27只隨機(jī)分為正常對(duì)照組NC組8只和糖尿病造模組19只。用鏈脲佐菌素（STZ）誘導(dǎo)T

2、1DM模型，16只成功。造模成功的大鼠被隨機(jī)分為糖尿病組DM組8只和替米沙坦治療組DT組8只。給DT組替米沙坦灌胃，NC組和DM組等量生理鹽水灌胃。替米沙坦治療8周后留取血標(biāo)本，用于檢測(cè)相關(guān)指標(biāo)，然后處死動(dòng)物并取出雙側(cè)睪丸，同時(shí)剪下附睪制備精子懸液。用40％甲醛溶液固定部分睪丸， HE染色；其余睪丸經(jīng)液氮冷凍透后于-70℃冰箱待用。放免法測(cè)胰島素（Insulin）及性激素。酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）法測(cè)脂聯(lián)素（APN）、白介素6（IL-

3、6）和腫瘤壞死因子α（TNF-α）。用實(shí)時(shí)熒光定量PCR測(cè)AdipoR mRNA的表達(dá)。脂聯(lián)素及其受體、AMPK、P-AMPK、AKT、P-AKT和e-NOS蛋白表達(dá)用免疫印跡法（Western Blot）測(cè)。
　　結(jié)果：
　　1.各組大鼠的體重、睪丸指數(shù)、精子數(shù)目、精子活動(dòng)率的比較
　　DM組較NC組大鼠睪丸重量明顯減輕（P<0.05），睪丸指數(shù)無(wú)明顯變化（P>0.05），精子數(shù)目、精子活動(dòng)率明顯降低（P<0.05）

4、。8周telmisartan治療后，DT組大鼠睪丸重量、睪丸指數(shù)無(wú)明顯變化（P>0.05），精子數(shù)目、精子活動(dòng)率明顯升高（P<0.05）。2.各組大鼠血糖、TCH、TG、FFA、性激素、Insulin、APN、睪丸NO、IL-6、TNF-α表達(dá)的比較
　　與NC組比較，DM組大鼠血糖、TCH、TG、FFA、睪丸組織NO、IL-6、TNF-α均明顯升高（P<0.05），血清及睪丸組織睪酮（T）、血清及睪丸組織脂聯(lián)素（APN）、胰島素

5、（Insulin）顯著降低（P<0.05），LH和FSH差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。8周替米沙坦治療后，DT組大鼠血糖、TCH、TG、FFA、NO、IL-6、TNF-α均明顯降低（P<0.05），血清及睪丸組織APN明顯上升（P<0.05），血清及睪丸組織T、Insulin、LH、FSH無(wú)明顯變化（P>0.05）。
　　3.各組大鼠睪丸組織形態(tài)學(xué)觀察比較
　　NC組睪丸組織生精小管及細(xì)胞排列正常，管腔內(nèi)精子較多。DM組

6、睪丸組織曲細(xì)精管萎縮變形，管腔內(nèi)空泡狀變性明顯，生精細(xì)胞數(shù)量明顯減少，生精小管之間的間質(zhì)組織比例增加，但間質(zhì)細(xì)胞體積縮小，胞漿減少，核固縮，間質(zhì)組織中微血管腔閉塞、淤血，炎性細(xì)胞浸潤(rùn)于睪丸間質(zhì)。DT組睪丸組織變性較DM組明顯好轉(zhuǎn)。
　　4.各組大鼠睪丸脂聯(lián)素受體1、2 mRNA的表達(dá)水平比較
　　與NC組比較，DM組大鼠睪脂聯(lián)素受體1 mRNA表達(dá)降低[（0.54±0.14）對(duì)（0.71±0.15），P<0.05]，脂聯(lián)素受

7、體2 mRNA表達(dá)無(wú)明顯變化[(0.67±0.11）對(duì)（0.77±0.16），P>0.05]。與DM組比較，DT組大鼠脂聯(lián)素受體1和2 mRNA表達(dá)均無(wú)明顯變化[（0.61±0.07）對(duì)（0.54±0.14）、（0.55±0.09）對(duì)（0.67±0.11），P>0.05]。
　　5.睪丸脂聯(lián)素及其受體、P-AMPK/AMPK、P-AKT/Akt、eNOS蛋白表達(dá)水平的比較
　　DM組較NC組大鼠睪丸脂聯(lián)素、脂聯(lián)素受體1、P-

8、AMPK/AMPK蛋白表達(dá)均明顯降低[（0.66±0.09）對(duì)（1.00±0.00），（0.68±0.05）對(duì)（1.00±0.00），（0.34±0.11）對(duì)（1.00±0.00），均P<0.05]，P-AKT/AKT和eNOS蛋白表達(dá)顯著增高[（1.54±0.27）對(duì)（1.00±0.00），（1.56±0.26）對(duì)（1.00±0.00），P<0.05]，AdipoR2蛋白表達(dá)無(wú)明顯變化[（1.02±0.13）對(duì)（1.00±0.00），

9、P>0.05]。替米沙坦治療后，DT組大鼠睪丸脂聯(lián)素和脂聯(lián)素受體1蛋白表達(dá)顯著增高[（0.84±0.09）對(duì)（0.66±0.09），（0.80±0.07）對(duì)（0.68±0.05），P<0.05]，P-AKT/AKT和eNOS表達(dá)蛋白顯著降低[（1.24±0.39）對(duì)（1.54±0.27），（1.16±0.47）對(duì)（1.56±0.26），P<0.05]，而P-AMPK/AMPK和脂聯(lián)素受體2蛋白表達(dá)無(wú)明顯變化[（0.65±0.52）對(duì)（0