替米沙坦對2型糖尿病大鼠心肌脂聯素受體2表達的影響.pdf

1、目的：
　　 采用動物實驗，用高糖、高脂飲食加小劑量鏈脲佐菌素(STZ)的方法誘導糖尿病模型。觀察2型糖尿病大鼠心肌組織脂聯素受體2(AdipoR2)及葡萄糖轉運蛋白4(GluT4)的表達情況。探討替米沙坦對2型糖尿病大鼠心肌AdipoR2及GluT4表達的影響，以研究其對2型糖尿病心肌病變的防治作用。
　　 方法：
　　 從36只雄性Wistar大鼠中隨機抽取10只作為健康對照組(A組，n=10)，其余為糖尿病

2、模型組(n=26)。A組給予普通飼料，模型組給予高糖高脂飼料。4周后，模型組腹腔注射小劑量STZ30 mg/kg。以實驗第6周末空腹血糖(FBG)≥7.8mmol/L且伴有胰島素抵抗者為造模成功。共成模20只。將成模者再隨機分為兩組，糖尿病組(B組，n=10)及糖尿病替米沙坦治療組(C組，n=10)。C組每天給予替米沙坦5 mg/kg灌胃，A組及B組予等量生理鹽水灌胃。藥物干預12周后，各組大鼠禁食12小時，稱體重。麻醉動物，檢測心功能

3、。腹主靜脈采血，肝素抗凝，離心留取血漿以備測定空腹血糖、血脂、血胰島素及血脂聯素，并計算胰島素敏感指數。處死動物，立即取出心臟，用生理鹽水沖洗，吸干水分，稱重。取部分左心室置于液氮中冷凍，凍透后-70℃保存?zhèn)溆谩Ａ硪徊糠肿笮氖腋栺R林液固定，脫水石蠟包埋，常規(guī)切片，以備免疫組織化學染色。用逆轉錄-聚合酶鏈式反應(RT-PCR)的方法測定大鼠心肌AdipoR2mRNA、GluT4mRNA及單核細胞趨化蛋白-1(MCP-1)mRNA的表達，

4、用免疫組織化學染色法檢測AdipoR2蛋白在心肌組織中的表達，用酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測血漿脂聯素水平。
　　 結果：
　　 1.一般情況：與A組比較，B組糖尿病大鼠心重/體重增加，空腹血糖、血甘油三酯、血總膽固醇及血漿胰島素水平均顯著升高(P＜0.05)，胰島素敏感指數明顯下降(P＜0.05)。替米沙坦治療后，C組糖尿病大鼠心重/體重降低，空腹血糖、血甘油三酯、血總膽固醇、血漿胰島素降低，胰島素敏感指數升高(P

5、＜0.05)。
　　 2.血漿脂聯素水平及心肌組織AdipoR2表達
　　 與A組比較，B組糖尿病大鼠血漿脂聯素水平、心肌組織AdipoR2mRNA和蛋白表達均顯著降低(P＜0.05)。替米沙坦治療后，C組糖尿病大鼠血漿脂聯素水平、心肌組織AdipoR2mRNA和蛋白表達均明顯升高(P＜0.05)。
　　 3.心肌組織GluT4表達
　　 與A組比較，B組糖尿病大鼠GluT4mRNA表達降低(P＜0.01

6、)。替米沙坦治療后，C組糖尿病大鼠GIuT4mRNA表達上升(P＜0.05)。
　　 4.心肌組織MCP-1表達
　　 與A組比較，B組糖尿病大鼠MCP-1mRNA表達升高(P＜0.05)。替米沙坦治療后，C組糖尿病大鼠MCP-1mRNA表達降低(P＜0.05)。
　　 5.大鼠心肌組織Masson三色染色光鏡下觀察顯示：A組大鼠心肌細胞排列整齊，細胞核大小均一，呈圓形或橢圓形，染色均勻呈黑色。胞漿染色均勻呈紅色

7、。B組糖尿病大鼠心肌細胞排列紊亂，細胞核大小不一，肌纖維增生變粗，細胞間界限不清，膠原纖維增加。經替米沙坦治療后，C組大鼠心肌細胞變性較B組明顯好轉。
　　 6.心功能指標
　　 與A組比較，B組糖尿病大鼠等容舒張期左室內壓下降的最大速率(-dp/dtmax，mmHg/s)顯著下降(P＜0.05)。替米沙坦治療后，C組糖尿病大鼠-dp/dtmax(mmHg/s)明顯高于B組。
　　 結論：
　　 1.成功

8、制備了2型糖尿病模型。該模型適用于2型糖尿病及其心肌病變的研究。
　　 2.糖尿病大鼠心重/體重增加，血漿脂聯素水平、心肌AdipoR2mRNA和蛋白表達以及GluT4mRNA表達均顯著降低。替米沙坦治療后，糖尿病大鼠心重/體重降低，血漿脂聯素水平、心肌AdipoR2mRNA和蛋白表達以及GIuT4mRNA表達均顯著升高。
　　 3.糖尿病大鼠心肌MCP-1mRNA表達顯著升高，替米沙坦治療后，MCP-1mRNA表達顯著