去鐵胺對(duì)脂多糖誘發(fā)的小鼠中樞神經(jīng)炎癥反應(yīng)與記憶損傷的改善作用.pdf

1、第一部分脂多糖(LPS)腦室注射誘發(fā)認(rèn)知功能障礙動(dòng)物模型的建立
　　目的:探討脂多糖單次腦室注射對(duì)C57小鼠認(rèn)知功能的影響，以期建立中樞炎性相關(guān)的認(rèn)知功能障礙的小鼠模型。方法:將40只C57小鼠隨機(jī)分為5組，分別為溶劑對(duì)照組與LPS10ng、100ng、2000ng、5000ng劑量組，進(jìn)行Morris水迷宮(MWM)實(shí)驗(yàn)。于第1～5日進(jìn)行水迷宮空間獲得性訓(xùn)練，第6日腦室單次分別給予LPS0、10、100、2000、5000ng，

2、第7～9日進(jìn)行水迷宮空間探索實(shí)驗(yàn)與工作記憶檢測(cè)。結(jié)果:與溶劑對(duì)照組相比，脂多糖給藥組均引起小鼠在Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)中認(rèn)知功能下降，其中2000ng LPS給藥組分別引起水迷宮空間探索實(shí)驗(yàn)中小鼠穿臺(tái)次數(shù)、平臺(tái)周邊路程、目標(biāo)象限停留時(shí)間百分比及目標(biāo)象限停留路程百分比均顯著減少，工作記憶檢測(cè)中登臺(tái)潛伏期明顯延長(zhǎng)。小結(jié):單次LPS(2μg)腦室注射可引起C57小鼠認(rèn)知功能障礙，提示LPS腦室注射導(dǎo)致炎性損傷可以作為認(rèn)知功能障礙的候選模型。<

3、br>　　第二部分去鐵胺(DF0)對(duì)LPS誘發(fā)小鼠認(rèn)知功能障礙的改善及機(jī)制
　　目的:探討DFO對(duì)LPS誘發(fā)小鼠認(rèn)知損傷的改善作用及機(jī)制。方法:將48只C57小鼠隨機(jī)分為6組，分別為溶劑對(duì)照組、LPS模型組與DFO0.1μg、0.5μg、2.5μg、5μg治療組，進(jìn)行Morris水迷宮(MWM)實(shí)驗(yàn)以探索DFO對(duì)LPS誘發(fā)認(rèn)知障礙的改善的最佳劑量。另將100只C57小鼠隨機(jī)分為4四組:溶劑對(duì)照組、DFO組、LPS組和LPS+DFO

4、組。0.5μg DFO于2μg LPS腦室注射前3日給藥，對(duì)照組給予等量人工腦脊液，給藥方式均為側(cè)腦室注射。每日行為學(xué)實(shí)驗(yàn)或給藥前進(jìn)行小鼠體質(zhì)量測(cè)量。LPS給藥6h、24h、48h、72h后將小鼠行心臟灌流并取腦，通過(guò)檢測(cè)海馬組織中小膠質(zhì)細(xì)胞狀態(tài)、IL-1β和TNF-α水平、細(xì)胞凋亡蛋白caspase-3與糖原合酶激酶3β(GSK3β)表達(dá)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)活性及海馬組織鐵代謝狀態(tài)的改變等指標(biāo)以評(píng)估LPS引起的

5、小鼠海馬損傷及DFO的神經(jīng)保護(hù)作用及可能機(jī)制。結(jié)果:DFO預(yù)給藥明顯改善了LPS引起的小鼠在Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)中認(rèn)知樣行為的下降，而并未對(duì)自發(fā)活動(dòng)造成明顯改變。DFO減輕了LPS誘發(fā)的海馬組織小膠質(zhì)細(xì)胞激活與炎癥因子IL-1β和TNF-α的上升，同時(shí)預(yù)防性減弱了caspase-3蛋白的表達(dá)增多、GSK3β激活及MDA與SOD水平的改變。DFO明顯逆轉(zhuǎn)LPS引起的海馬組織鐵沉積及鐵代謝相關(guān)蛋白的表達(dá)水平變化。小結(jié):DFO通過(guò)阻止神經(jīng)細(xì)