乳酸?；请奈⑶蛑苽浼捌潴w內外性質的考察.pdf

1、目的：
　　2型糖尿病(Type2 diabetes,T2DM)是一種多基因遺傳性的疾病，占糖尿病總人數的80％以上。艾塞那肽能夠以葡萄糖依賴的方式控制血糖、刺激胰島素分泌、抑制胰高血糖素分泌、延緩胃排空、減輕體重，同時降低低血糖發(fā)生的危險，適用于治療2型糖尿病。但是艾塞那肽在體內的半衰期短，其注射劑需要每天注射兩次，頻繁給藥使其注射劑的應用受到極大的限制。雖然艾塞那肽微球的作用時間明顯延長，但是仍有必要研發(fā)順應性更好的制劑。

2、r>　　本課題旨在采用乳酸對艾塞那肽進行?；揎棧樗嵝》肿永谧⑸浣o藥后多肽與血漿蛋白的物理結合，從而延長藥物的體內半衰期；同時，將酰化修飾后的乳酸-艾塞那肽?；锇d于PLGA高分子材料中制備成長效緩釋微球制劑，在體內緩慢釋放，減少給藥次數，提高患者的順應性。
　　方法：
　　1、采用乳酸?；请纳甚；a物，分別用高效液相色譜和質譜對?；a物進行分離、鑒定。采用大鼠考察艾塞那肽連接一個乳酸的?；铮↙A-M1）的體

3、內藥代動力學。以db/db小鼠為模型動物考察LA-M1的體內藥效學，同時進行小鼠的IPGTT實驗考察。
　　2、采用乳化-溶劑揮發(fā)法制備LA-M1微球，搖床法考察LA-M1微球的體外釋放曲線。并分別以SD大鼠和db/db小鼠為模型動物考察LA-M1微球的體內藥代動力學特征及藥效學特征。
　　3、采用MTT法測定LA-M1對RIN-m5f細胞的促進細胞增殖的作用。
　　結果:
　　1、合成得到了連接不同數量乳酸的艾

4、塞那肽?；?，用質譜對其進行表征，四個色譜峰根據保留時間的延長依次為連接一個乳酸的艾塞那肽酰化物、連接兩個乳酸的艾塞那肽酰化物、不同位置的連接兩個乳酸的艾塞那肽?；?、連接四個乳酸的艾塞那肽酰化物。制備液相分離連接一個乳酸的艾塞那肽?；風A-M1。大鼠體內的藥動學結果顯示，LA-M1在體內2 h達到最大血藥濃度，半衰期t1/2為5.948 h，顯著長于艾塞那肽的半衰期（t1/2為2.588 h）。注射LA-M1后，糖尿病小鼠的血糖值顯

5、著下降，具有明顯的降血糖效果。
　　2、制備LA-M1微球，結果顯示：實驗中通過對不同處方的篩選，選擇出最優(yōu)處方：制備方法選擇單乳化-溶劑揮發(fā)法，高分子材料為PLGA75252A，PVA濃度為1%，油相：水相體積比1.5:100，均質速度1500 rpm，制備的微球，球形圓整，表面光滑，載藥量為4.72%，包封率為94.4%。體外釋放結果顯示，LA-M1微球具有良好的緩釋效果，能夠在體外緩慢釋放約40天。體內藥動學研究結果顯示，L

6、A-M1微球能夠在大鼠體內緩慢釋放近30天，長于艾塞那肽微球的20天的體內釋放時間。藥效學研究結果顯示LA-M1微球的體內降血糖作用與艾塞那肽微球相似，明顯低于生理鹽水組的血糖值，同時對小鼠降低血糖的作用時間長于艾塞那肽微球。而且，不同劑量的LA-M1微球在體內的作用時間有不同的影響，隨著劑量的增加，LA-M1微球的體內作用時間延長。
　　3、實驗采用大鼠胰島瘤RIN-m5f細胞考察LA-M1對胰島細胞的作用，采用MTT法測定LA

7、-M1對RIN-m5f細胞的促進細胞增殖的作用，實驗中我們以細胞的存活率為指標，結果顯示LA-M1具有促進胰島瘤細胞增殖的作用，其作用類似于艾塞那肽，這種促進細胞增殖的作用在一定范圍內隨著LA-M1濃度的增大而增加，具有時間和劑量依賴性。
　　結論：
　　1、合成并分離的艾塞那肽單乳酸?；風A-M1在體內半衰期長于艾塞那肽；LA-M1在體內具有降血糖作用。
　　2、LA-M1微球在體內的作用時間長于艾塞那肽微球，降血

8、糖作用效果顯著，并且具有劑量依賴性。
　　3、LA-M1能促進胰島瘤細胞增殖。
　　研究創(chuàng)新點：
　　本課題首次同時采用?；揎椔摵衔⑶蜷L效制劑方式實現艾塞那肽的長效性，延長艾塞那肽在體內的作用時間，降低頻繁給藥給患者帶來的痛苦。采用乳酸對艾塞那肽進行?；揎?，乳酸小分子利于注射給藥后多肽與血漿蛋白的物理結合，延長藥物的體內半衰期；將?；揎椇蟮娜樗?艾塞那肽?；锇d于PLGA高分子材料中制備成微球制劑，體內可實現3