葛黃顆粒對酒精性肝病模型大鼠的藥效學(xué)研究.pdf

1、目的：
　　將葛黃顆粒運(yùn)用于酒精性肝病動物模型，觀察其療效并初步探索藥物作用機(jī)制，為該藥的臨床運(yùn)用和進(jìn)一步開發(fā)研究提供理論依據(jù)。
　　方法：
　　選用雄性大鼠110只并隨機(jī)將其分為6組，即正常對照組（正常組）、模型組、美他多辛對照組（對照組）、葛黃顆粒干預(yù)的高、中、低劑量組（簡稱高劑量組、中劑量組及低劑量組），正常組10只，其余組為20只。模型組、葛黃顆粒高、中、低劑量組和美他多辛對照組均給予紅星二鍋頭灌胃（酒精濃度為

2、30％-53%，劑量為2.0ml·100g-1·d），正常組使用同劑量的蒸餾水灌胃，全部動物均給予普通飼料。酒精灌胃6周后，開始予以藥物干預(yù)，葛黃顆粒各劑量組分別予以不同濃度的的葛黃顆粒溶液灌胃，美他多辛對照組灌胃美他多辛溶液。當(dāng)12周灌胃完成后，處死所有的大鼠，行油紅O及HE染色觀察肝組織的病理學(xué)改變；檢測血清AST、ALT、TC、TG，肝組織TC、TG；Western Blot測定肝細(xì)胞色素P4502E1的蛋白表達(dá)水平；測定乙醇脫氫

3、酶(ADH)、乙醛脫氫酶(ALDH)等指標(biāo)。
　　結(jié)果：
　　1、肝組織油紅O及HE染色結(jié)果油紅O染色：正常組大鼠肝細(xì)胞形態(tài)正常，結(jié)構(gòu)清晰，核呈藍(lán)色，肝細(xì)胞內(nèi)未見明顯紅色脂滴形成。模型組大鼠肝細(xì)胞明顯腫大，視野內(nèi)可見彌漫性紅色脂滴形成，偶融合成片，核多被脂滴擠向一側(cè)。高、中、低劑量組肝細(xì)胞內(nèi)紅色脂滴明顯少于模型組，且隨著劑量的增加，紅色脂滴逐漸減少，恢復(fù)接近至正常。對照組肝細(xì)胞形態(tài)與正常組相比無明顯改變，肝細(xì)胞內(nèi)可見少量紅色

4、脂滴形成。HE染色：正常組大鼠肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)清晰，邊界清楚，排列規(guī)整。模型組肝細(xì)胞形態(tài)明顯腫大，結(jié)構(gòu)不清晰，邊界模糊，細(xì)胞排列層次紊亂，肝細(xì)胞內(nèi)可見大小不一的脂肪空泡，少數(shù)細(xì)胞核被擠到一邊。高劑量組大鼠肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)、組織形態(tài)明顯改善，肝細(xì)胞排列較整齊，僅少數(shù)細(xì)胞大小欠均勻，呈輕度腫大。中劑量組肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)、組織形態(tài)與模型組相比有所改善，但肝細(xì)胞仍存在腫大。低劑量組與模型組相比，病理無明顯改變，肝細(xì)胞仍腫大，細(xì)胞排列層次紊亂，肝細(xì)胞內(nèi)可見脂肪空泡

5、。對照組肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)排列較整齊，肝細(xì)胞內(nèi)僅見極少數(shù)脂肪空泡形成。
　　2、肝臟指數(shù)，血清AST、ALT、TG、TC，肝組織TG、TC，P4502E1的蛋白表達(dá)：在模型組大鼠中上述指標(biāo)均升高明顯(P<0.001)；經(jīng)葛黃顆粒及美他多辛藥物干預(yù)后，上述指標(biāo)在高、中、低劑量組及對照組均有不同程度的降低，其中以對照組及高劑量組降低尤為明顯(P<0.001)，中、低劑量組降低不明顯，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>O.05)；高劑量組與對照組相比，在肝臟指

6、數(shù)，血清AST、ALT、TG，肝組織TG，P4502E1的蛋白表達(dá)上差異無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),但在TC上差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05）。
　　3、血清ADH及ALDH含量：與正常組對比，血清ALDH含量在模型組中存在顯著降低(P<0.001)，ADH含量表達(dá)升高明顯(P<0.001)，經(jīng)葛黃顆粒及美他多辛藥物干預(yù)后，ALDH在高劑量組及對照組含量明顯上升(P<0.05)，ADH在高劑量組及對照組含量明顯下降(P<0

7、.05）；中、低劑量組ALDH升高、ADH降低不明顯，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；高劑量組與對照組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　結(jié)論：
　　1、單純梯度白酒灌胃法可以成功建立酒精性肝病大鼠模型。
　　2、葛黃顆?？梢愿纳凭凭愿尾〈笫蟮母闻K病理學(xué)損傷程度，降低肝臟脂肪堆積和血脂水平，改善肝功能，對ALD具有良好的療效。
　　3、葛黃顆?？梢允咕凭愿尾〈笫笱逯械腁DH含量明顯減少，ALDH含