枳葛口服液防治大鼠酒精性肝病的作用機(jī)制研究.pdf

1、目的：
　　利用動物實(shí)驗(yàn)觀察枳葛口服液對酒精性肝?。ˋLD）模型大鼠的防治療效以及對與脂質(zhì)代謝、免疫機(jī)制、氧化應(yīng)激及與乙醇代謝相關(guān)指標(biāo)的影響，初步探討該保健制劑對ALD的防治作用及其作用機(jī)制。
　　方法：
　　1.動物及分組：SD雄性大鼠85只隨機(jī)地分為6組：正常組、ALD動物模型組（模型組）、枳葛口服液高劑量組（高劑量組）、枳葛口服液中劑量組（中劑量組）、枳葛口服液低劑量組（低劑量組）及解酒靈口服液陽性對照組（對照組

2、）。正常組10只，余各每組15只。
　　2.造模及給藥：除正常組外的其余各組均給予52％瀘州老白干(由瀘州老窖股份有限公司生產(chǎn))灌胃1.0ml·100g-1·d，同時枳葛口服液組的高、中、低劑量三組各分別灌服枳葛口服液1.0ml·100g-1·d、0.5ml·100g-1·d和0.25ml·100g-1·d，對照組灌胃解酒靈口服液0.5ml·100g-1·d，正常組采用蒸餾水灌胃1.0ml·100g-1·d。以上各組均自由飲水，飼

3、普通飼料，每天20點(diǎn)以后禁食不禁水，第2天9點(diǎn)灌胃后給予普通飼料，每周五各稱體重1次并做好記錄。于第12周末處死所有大鼠，并將每只大鼠留取血清及完整肝組織，稱取肝組織濕重。
　　3.指標(biāo)檢測：HE染色觀察肝組織的結(jié)構(gòu)變化，油紅O染色了解肝臟的脂質(zhì)情況；全自動生化分析儀檢測血清ALT、AST、TC、TG值；比色法檢測肝臟內(nèi)TC、TG含量；用Western Blot法測定肝細(xì)胞色素P4502E1蛋白表達(dá)水平；ELISA法檢測TNF-α

4、、IL-6、IL-10、ADH及ALDH。
　　結(jié)果：
　　1.大鼠肝組織HE染色觀察提示：正常組大鼠肝小葉及細(xì)胞形狀大小結(jié)構(gòu)均勻，邊界分明、呈現(xiàn)放射狀布列整齊規(guī)則；模型組大鼠肝小葉結(jié)構(gòu)不規(guī)則，邊界模糊，細(xì)胞內(nèi)可見大面積大小泡性脂肪空泡，部分細(xì)胞核偏移；高劑量組肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)接近正常組；與模型組相比，中劑量組和對照組均有所改善；模型組和低劑量組基本相似。
　　2.部分肝臟油紅O染色可見：正常組局部肝組織內(nèi)呈現(xiàn)極少量的紅色脂

5、肪顆粒；模型組可見大面積肝細(xì)胞及其周圍出現(xiàn)較多的紅色脂肪顆粒聚集；高劑量組紅色脂滴與正常組大鼠相似；中劑量組和對照組有所增多；而低劑量組見大面積紅色脂肪顆粒聚集。
　　3.各組肝臟指數(shù)、血清IL-6、TNF-α、ALT、AST、TC、TG、ADH及肝組織TC、TG、P4502E1的變化：與正常組相比，模型組較正常組高（P＜0.05）；與模型組相比，枳葛口服液高、中、低劑量組呈現(xiàn)依次遞增的趨勢，其中，枳葛口服液高劑量組明顯低于模型組

6、（P＜0.05）；枳葛口服液高劑量組血清TG高于正常組（P＜0.05），其余指標(biāo)枳葛口服液高劑量組與正常組相接近，兩者相比差異無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；解酒靈口服液對照組較枳葛口服液中劑量組高，兩組相比差異無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。
　　4.血清IL-10、ALDH的變化：與正常組相比，模型組的IL-10、ALDH較正常組低（P＜0.05）；枳葛口服液高劑量組IL-10低于正常組（P＜0.05）；枳葛口服液高劑量組

7、ALDH低于正常組，但兩組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；與模型組相比，枳葛口服液高、中、低劑量組IL-10、ALDH呈現(xiàn)依次遞減趨勢，枳葛口服液高劑量組明顯高于模型組（P＜0.05）；解酒靈口服液對照組的IL-10較枳葛口服液中劑量組高，兩組差異不顯著（P＞0.05）；解酒靈口服液對照組的ALDH較枳葛口服液中劑量組低，兩組差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.普通飼料+梯度酒精灌胃法可以使SD大

8、鼠肝臟內(nèi)脂肪堆積，肝臟指數(shù)增加，肝功能受損，血脂增高，血清中炎癥因子增加，從而酒精性肝病造模成功。
　　2.枳葛口服液可以減輕乙醇誘發(fā)的肝功能損傷，降低肝臟指數(shù)，降低血脂，減少血清中炎癥因子、增加血清中抗炎因子，減少血清ADH的含量、增加血清ALDH含量，減少肝細(xì)胞色素P4502E1蛋白的表達(dá)，從而對酒精性肝病具有良好的防治作用。
　　3.枳葛口服液防治酒精性肝病的作用機(jī)制可能有如下幾點(diǎn)：
　?、贉p少肝組織內(nèi)脂質(zhì)堆積及