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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
研究miR-181a/b通過(guò)血清反應(yīng)因子(SRF,serum response factor)對(duì)血管平滑肌細(xì)胞向合成型表型轉(zhuǎn)化及細(xì)胞增殖遷移能力的調(diào)控作用。
方法:
將miR-181a/b瞬時(shí)轉(zhuǎn)染至人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞(HAoSMCs)中,用實(shí)時(shí)定量PCR、CCK-8檢測(cè)方法和transwell實(shí)驗(yàn)分別檢測(cè)平滑肌細(xì)胞的表型標(biāo)記基因的表達(dá)水平、細(xì)胞增殖能力和遷移能力的變化。生物信息學(xué)分析預(yù)測(cè)miR-18
2、1a/b直接靶向血清反應(yīng)因子的3’UTR(非編碼區(qū)),并通過(guò)實(shí)時(shí)定量PCR、western blot及雙熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)分別驗(yàn)證。
結(jié)果:
實(shí)時(shí)定量PCR結(jié)果表示在HAoSMCs中過(guò)表達(dá)miR-181a/b能夠抑制收縮表型標(biāo)記基因的表達(dá),促進(jìn)合成表型標(biāo)記基因的表達(dá),CCK-8與transwell實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明miR-181a/b增強(qiáng)細(xì)胞的增殖和遷移能力。雙熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)與western blot結(jié)果表明MiR-181
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