布洛芬作用于酸敏感離子通道發(fā)揮腦保護(hù)作用的機(jī)制研究.pdf

1、目的:腦卒中是一種急性的腦血管疾病。因其具有高發(fā)病率、高復(fù)發(fā)率、高致殘率和死亡率，嚴(yán)重影響著患者的生活質(zhì)量。其中，缺血性腦卒中較出血性腦卒中具有更高的發(fā)病率，占腦卒中總數(shù)的60％-70％。缺血性腦卒中的發(fā)病機(jī)制和病理生理過(guò)程極其復(fù)雜，因此給臨床治療帶來(lái)了極大的困難。酸中毒是組織缺血缺氧后的一個(gè)重要病理生理變化。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，胞外pH值下降能激活一種特殊的配體門(mén)控通道，酸敏感離子通道(Acid-sensing ion channels—

2、ASICs)，這極大地改變了人們對(duì)缺血性腦損傷機(jī)制的認(rèn)識(shí)[1]。目前，已經(jīng)克隆出六種ASIC亞基(1a、1b、2a、2b、3和4)[2]，其中，H+敏感性高且對(duì)Ca2+通透ASIC1a同聚體通道和ASIC1a/2b通道在參與腦缺血和再灌注損傷過(guò)程中發(fā)揮著重要作用[3-8]。布洛芬是臨床上常用的抗炎鎮(zhèn)痛藥，早在上世紀(jì)九十年代就有文章報(bào)道了其腦保護(hù)作用[9，10]。但是，對(duì)于其神經(jīng)保護(hù)作用的機(jī)制目前還沒(méi)有統(tǒng)一的定論。自從ASICs被發(fā)現(xiàn)以來(lái)

3、，已有多篇文獻(xiàn)[11-13]報(bào)道了布洛芬對(duì)ASICs的作用。本研究旨在①觀(guān)察大腦中動(dòng)脈阻塞(MCAO)后大鼠皮層缺血半暗帶ASIC1a和ASIC2a表達(dá)變化情況并探討其意義;②觀(guān)察布洛芬的神經(jīng)保護(hù)作用及其對(duì)ASIC1a和ASIC2a表達(dá)和上膜的影響，探索其以ASIC2a為靶點(diǎn)的神經(jīng)保護(hù)作用的機(jī)制。
　　方法:①20只SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組(sham)10只和MCAO模型組(MCAO)10只，于術(shù)后24h取腦，提取腦組織蛋白和分離

4、膜蛋白，用Western blot檢測(cè)ASIC1a和ASIC2a的總蛋白和膜蛋白情況;②48只SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)+溶媒組(S+Rn=12)、假手術(shù)+布洛芬組(S+B n=12)、MCAO模型+溶媒組(C+R n=12)、MCAO模型+布洛芬組(C+B n=12)，于術(shù)后24h通過(guò)神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分、TTC染色等方法觀(guān)察布洛芬的腦保護(hù)作用和用Western blot觀(guān)察布洛芬對(duì)皮層缺血半暗帶ASIC1a和ASIC2a蛋白含量的影響。

5、>　　結(jié)果:①腦缺血再灌注24h后，與假手術(shù)組相比，MCAO模型組皮層缺血半暗帶的ASIC1a的表達(dá)沒(méi)有明顯變化(P=0.7004)，其膜蛋白含量增加（P＜0.001），ASIC2a的表達(dá)明顯上調(diào)（P＜0.001）;②布洛芬能提高M(jìn)CAO模型大鼠的神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分(P＜0.05)，減少腦梗死容積（P＜0.01），并且能降低皮層缺血半暗帶ASIC1a膜蛋白的含量(P＜0.05)和下調(diào)ASIC2a的表達(dá)（P＜0.01）。
　　結(jié)論:布洛