葉下珠提取物對血吸蟲病肝纖維化的作用及IL-13-miR-21-Smad7信號通路的干預(yù)機制研究.pdf

1、第一部分葉下珠制劑——海珠益肝膠囊對血吸蟲病肝纖維化患者血清Interleukin-13（IL-13）水平的影響
　　目的：探討葉下珠制劑——海珠益肝膠囊對血吸蟲病肝纖維化患者血清中IL-13水平的影響。方法：選取血吸蟲肝纖維化患者20例，隨機分為治療組患者和對照組，每組各10例，對照組患者給予基礎(chǔ)治療，治療組患者在基礎(chǔ)治療的基礎(chǔ)上加用海珠益肝膠囊，兩組患者均接受1個月治療。Elisa法檢測兩組患者血清中IL-13的水平。結(jié)果：經(jīng)

2、1個月治療后，兩組患者血清中IL-13水平分別較治療前明顯下降（P<0.01）；治療后，治療組血清中IL-13水平較對照組水平降低（P<0.05）。結(jié)論：葉下珠提制劑——海珠益肝膠囊可明顯降低血吸蟲病肝纖維化患者血清中IL-13的水平，擴大了海珠益肝膠囊的應(yīng)用范圍。
　　第二部分葉下珠提取物對血吸蟲病肝纖維化小鼠模型肝臟組織病理學(xué)影響
　　目的：建立血吸蟲病肝纖維化小鼠模型，研究葉下珠提取物對血吸蟲感染所致肝纖維化小鼠肝臟病

3、理學(xué)的影響。方法：利用日本血吸蟲尾蚴感染BALB/c小鼠建立感染模型，將50只小鼠隨機分為葉下珠提取物高、中、低濃度組，正常組和模型組，每組各10只。血吸蟲感染4周后，各組分別給予相應(yīng)的藥物干預(yù)，模型對照組、正常對照組僅給予生理鹽水，不予藥物干預(yù)。連續(xù)灌胃4周后，記錄小鼠的生存狀況。實驗開始8周后處死小鼠取標本，免疫組化法檢測結(jié)締組織生長因子(Connective tissue growth factor，CTGF)的表達；Hemato

4、xylin-eosin（HE）染色、MASSON染色觀察小鼠肝臟病理學(xué)變化。結(jié)果：與造模組小鼠肝臟相比，高、中、低葉下珠提取物濃度干預(yù)組小鼠肝臟肉芽腫面積較小（P<0.01或0.05），纖維化程度較輕（P<0.01或0.05），肝組織CTGF蛋白表達水平較低（P <0.01或0.05）。結(jié)論：葉下珠提取物可明顯減輕日本血吸蟲對小鼠感染模型肝病理學(xué)損傷，緩解肝肉芽腫所致肝纖維化程度。
　　第三部分葉下珠提取物對血吸蟲病肝纖

5、維化小鼠體內(nèi)IL-13/miR-21/smad7信號通路的影響
　　目的：研究葉下珠提取物對血吸蟲病肝纖維化小鼠體內(nèi)IL-13/miR-21/smad7信號通路的作用。方法：利用日本血吸蟲尾蚴感染BALB/c小鼠模型，將50只小鼠隨機分為葉下珠提取物高濃度組、中濃度組、低濃度組，正常組和模型組，每組各10只。血吸蟲尾蚴感染四周后，各組分別給予相應(yīng)的藥物，空白組給予生理鹽水，連續(xù)灌胃四周后。取肝臟及血清標本，Elisa法檢測血清中I

6、L-13水平，RT-PCR檢測miR-21、smad7和CTGF mRNA的水平，western blot檢測Smad7、Smad1、p-Smad1、Smad2、p-Smad2、ERK1/2、p-ERK1/2和 TGF-β receptor I蛋白的表達水平。結(jié)果：與正常組相比，模型組miR-21和CTGF mRNA水平明顯升高（P<0.01），Smad7 mRNA和蛋白水平明顯下降（P<0.01），p-Smad1、p-Smad2、p-

7、ERK1/2和TGF-β receptor蛋白水平明顯升高（P<0.01）。相比模型組，隨著葉下珠提取物濃度的增高，抑制 miR-21 mRNA的表達越明顯（P<0.01或0.05），在轉(zhuǎn)錄水平和翻譯水平促進smad7 mRNA和蛋白的表達越顯著(P<0.01或0.05），葉下珠提取物同時可以降低 p-smad1、p-smad2、p-ERK1/2和 TGF-β receptor I的蛋白表達水平（p<0.01或0.05）。結(jié)論：在血吸蟲