驅(qū)鉛扶正方對(duì)鉛誘導(dǎo)PC-12細(xì)胞氧化應(yīng)激反應(yīng)的干預(yù)效應(yīng).pdf

1、目的：本實(shí)驗(yàn)采用醋酸鉛溶液誘導(dǎo)建立PC-12細(xì)胞鉛中毒的模型，觀察不同濃度醋酸鉛對(duì)具有神經(jīng)元特性的PC-12細(xì)胞的影響，和鉛中毒神經(jīng)系統(tǒng)損傷進(jìn)展中氧化應(yīng)激相關(guān)指標(biāo)的變化，以及驅(qū)鉛扶正方含藥血清對(duì)其的干預(yù)效應(yīng)，以探討驅(qū)鉛扶正方防治鉛中毒神經(jīng)系統(tǒng)損傷的作用機(jī)制。
　　方法：將PC-12細(xì)胞設(shè)置為不同的分組：空白組、陰性對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照組、醋酸鉛染毒組以及含藥血清組。用不同濃度的醋酸鉛溶液分別對(duì)PC-12細(xì)胞進(jìn)行刺激，通過(guò)MTT法檢測(cè)醋

2、酸鉛染毒組細(xì)胞生存率。用采血時(shí)間為末次給藥后2小時(shí)，10％濃度的驅(qū)鉛扶正方含藥血清對(duì)醋酸鉛溶液誘導(dǎo)之PC-12細(xì)胞進(jìn)行干預(yù)，用MTT法進(jìn)行檢測(cè)，觀察陽(yáng)性對(duì)照組和含藥血清組PC-12細(xì)胞生存率的變化，用黃嘌呤氧化酶法和硫巴比妥酸鹽法分別檢測(cè)各組PC-12細(xì)胞SOD活性和MDA含量的變化。
　　結(jié)果：1.醋酸鉛溶液對(duì)PC-12細(xì)胞生存率的影響：濃度越高的醋酸鉛溶液對(duì)PC-12細(xì)胞的刺激作用越大，其細(xì)胞的生存率越低。醋酸鉛染毒組用100

3、?l濃度為100?mol/L的醋酸鉛溶液對(duì)PC-12細(xì)胞進(jìn)行24小時(shí)的刺激，其細(xì)胞生存率接近50%（46.7%）；2.驅(qū)鉛扶正方含藥血清對(duì)PC-12細(xì)胞的影響：驅(qū)鉛扶正方之含藥血清的采血時(shí)間點(diǎn)為最末次給藥后2小時(shí)，且濃度為10%時(shí)，其能對(duì)染鉛之PC-12細(xì)胞產(chǎn)生最明顯的增殖作用；3.與氧化應(yīng)激相關(guān)的指標(biāo)在染鉛細(xì)胞中的變化：醋酸鉛染毒組的PC-12細(xì)胞經(jīng)醋酸鉛溶液的刺激后，SOD活性出現(xiàn)明顯的下降趨勢(shì)，MDA的含量出現(xiàn)明顯的增多；含藥血清

4、組的SOD活性出現(xiàn)很明顯的提高，MDA的含量開(kāi)始顯著下降；陽(yáng)性對(duì)照組中SOD活性、MDA含量均有一定的變化；4.氧化應(yīng)激與神經(jīng)系統(tǒng)損傷的關(guān)系：與陰性對(duì)照組相比，醋酸鉛染毒組的SOD活性有了明顯的降低，其MDA的含量有了很明顯的升高，具有顯著的差異（P<0.01）；相較于醋酸鉛染毒組，陽(yáng)性對(duì)照組的SOD的活性明表現(xiàn)出上升趨勢(shì)，MDA含量有顯著的下降（P<0.01），而與醋酸鉛染毒組相比較，含藥血清組的SOD活力出現(xiàn)明顯上升，MDA的含量出

5、現(xiàn)很明顯的上升（P<0.01），且與陽(yáng)性對(duì)照組相比，含藥血清組的SOD活力出現(xiàn)更加顯著的上升，MDA含量出現(xiàn)更加顯著的降低（P<0.01）。
　　結(jié)論：1.建立PC-12細(xì)胞鉛中毒模型，可選用100?l濃度為100?mol/L醋酸鉛刺激24h的標(biāo)準(zhǔn)，達(dá)到細(xì)胞半數(shù)抑制率；2.驅(qū)鉛扶正方含藥血清在濃度為10%時(shí)，并且于末次給藥后2 h采血，使染鉛PC-12細(xì)胞增殖最為明顯；3.對(duì)鉛中毒所引起的神經(jīng)系統(tǒng)的損傷，驅(qū)鉛扶正方能起到有效的治療