乙酰乙酸保護(hù)雙氧水引起的PC12細(xì)胞氧化應(yīng)激和細(xì)胞凋亡.pdf

1、本研究旨在探討酮體成分之一乙酰乙酸對神經(jīng)細(xì)胞氧化性損傷的保護(hù)作用及潛在的機(jī)制，以外源性過氧化氫處理建立神經(jīng)細(xì)胞系PC12細(xì)胞氧化性損傷的體外模型，并在此基礎(chǔ)上研究不同濃度的乙酰乙酸預(yù)處理對損傷的拮抗作用。實驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)，0.1-8.0mmol/L的乙酰乙酸對PC12細(xì)胞無細(xì)胞毒性，說明這個濃度區(qū)間的乙酰乙酸可以作為后續(xù)實驗安全劑量。通過MTT細(xì)胞活力分析、乳酸脫氫酶漏出實驗以及AnnexinⅤ/PI凋亡分析結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在150μmol/L的

2、過氧化氫的刺激下，PC12細(xì)胞表現(xiàn)出氧化性損傷和細(xì)胞凋亡率增高，而乙酰乙酸預(yù)處理有效地抑制了過氧化氫引起的細(xì)胞損傷和細(xì)胞凋亡。過氧化氫引起的細(xì)胞凋亡主要與氧化應(yīng)激及其介導(dǎo)的凋亡蛋白caspase-9和caspase-3激活有關(guān)。通過對胞內(nèi)活性氧水平的分析(DCFH-DA熒光探針)、抗氧化酶SOD和CAT的的活力分析（酶活檢測試劑盒）、凋亡蛋白caspase-9和caspase-3激活的分析(Western blot法)發(fā)現(xiàn)，0.5-4.

3、0mmol/L的乙酰乙酸預(yù)處理可以有效地抑制過氧化氫引起的氧化應(yīng)激和凋亡蛋白激活。
　　綜合結(jié)果可以確認(rèn)0.5-4.0mmol/L的乙酰乙酸可以有效地減少過氧化氫誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞細(xì)胞死亡和LDH漏出，降低細(xì)胞凋亡率，抵抗胞內(nèi)活性氧的升高，恢復(fù)抗氧化酶活力，抑制凋亡蛋白的激活?？傊?，乙酰乙酸對過氧化氫引起的PC12神經(jīng)細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷和細(xì)胞凋亡有良好的保護(hù)作用。本文為加深對乙酰乙酸的認(rèn)識提供理論依據(jù)，同時為治療神經(jīng)退行性疾病或缺血