腎盂內(nèi)壓力變化對腎臟損傷的研究.pdf

1、目的：
　　通過初步建立復(fù)雜性的腎內(nèi)正壓灌注、負(fù)壓吸引的動物實驗?zāi)Ｐ?，來對?fù)腎盂正壓灌注、負(fù)壓吸引灌流進行觀察，以研究不同的壓力變化對腎單位細(xì)微結(jié)構(gòu)的具體影響；以此作為基礎(chǔ)，探討現(xiàn)階段腔鏡手術(shù)的時候，腎內(nèi)壓力的合理安全范圍。
　　方法：
　　第一部分：
　　購買健康實驗用豬總共10只，在全身麻醉的狀態(tài)下進行實驗操作：留置4F輸尿管導(dǎo)管在實驗豬腎的盂輸尿管移行部；5只實驗豬使用特制壓力調(diào)節(jié)裝置，將腎的正壓灌注壓力分

2、別維持在50mmHg、100mmHg、150mmHg、200mmHg四個階段，5只實驗豬進行負(fù)壓吸引操作，使用特制壓力調(diào)節(jié)裝置，將負(fù)壓吸引力分別維持在-5mmHg、-10mmHg、-15mmHg、-20mmHg四個階段；以上壓力在保持10分鐘后，使用活檢穿刺針分別取下實驗用豬腎臟的腎上盞、中盞、下盞三處，組織厚度約為15mm，再固定后制作病理切片；
　　第二部分：
　　在第一部分的基礎(chǔ)之上，恢復(fù)腎內(nèi)的壓力在正常腎內(nèi)壓10分鐘

3、之后，再分別將腎內(nèi)的正壓灌注以及負(fù)壓吸引的壓力分別調(diào)整至50mmHg、100mmHg、150mmHg、200mmHg，和-5mmHg、-10、mmHg、-15mmHg、-20mmHg；再次保持以上各級別壓力10分鐘后，使用同樣方法采集腎臟標(biāo)本；再次重復(fù)以上操作：恢復(fù)腎內(nèi)正常壓力10分鐘后，再重復(fù)一次實驗操作，并再次獲得腎臟標(biāo)本。
　　第三部分：
　　完成第二部分實驗之后，取得150mmHg、200mmHg、-15mmHg、-

4、20mmHg的實驗用豬雙腎，取部分腎組織，其中需要兼顧部分腎皮質(zhì)、腎髓質(zhì)均有的組織，運用免疫組化的方法，檢測在不同壓力的情況下，細(xì)胞因子：TNF-α和TGF-β1的表達(dá)發(fā)生了什么變化。
　　第四部分：
　　使用電子顯微鏡，觀察在各個級別的壓力變化，時間的累積下，腎小球、腎小囊、近曲腎小管、腎間質(zhì)的具體變化情況。
　　結(jié)果：
　　當(dāng)腎內(nèi)正壓灌注壓力維持在50mmHg時，當(dāng)時間積累不同時，腎小球、腎小囊以及近曲小管和

5、腎間質(zhì)都沒有發(fā)生明顯的改變。當(dāng)腎內(nèi)正壓灌注壓力超過100mmHg、而低于200 mmHg時，時間積累不同時，腎小球、腎小囊沒有明顯的病理改變，但是近曲小管、腎間質(zhì)的病理損傷已經(jīng)開始凸顯，近曲小管的上皮細(xì)胞開始發(fā)生微絨毛脫落；而細(xì)胞膜以及其他細(xì)胞器，均紛紛碎裂；腎間質(zhì)有腫脹，炎性細(xì)胞被浸潤；并且以上一系列的病理變化，均伴隨著時間的積累，而逐漸加重。當(dāng)腎內(nèi)正壓灌注壓力超過30分鐘，壓力維持在150mmHg、200mmHg時，灌注側(cè)的實驗豬腎

6、臟的TNF-α和TGF-β1的表達(dá)水平，均是顯著增加；而對側(cè)腎臟的TNF-α和TGF-β1的表達(dá)水平均沒有顯著變化（P<0.05）。
　　當(dāng)腎內(nèi)負(fù)壓吸引力維持在-5mmHg時，當(dāng)時間積累不同時，腎小球、腎小囊以及近曲腎小管和腎間質(zhì)，都沒有發(fā)生明顯的改變。當(dāng)腎內(nèi)負(fù)壓吸引力維持在-10mmHg、而低于-15 mmHg時，當(dāng)時間積累不同時，腎小球、腎小囊都沒有發(fā)生明顯的改變，但近曲小管上皮細(xì)胞以及間質(zhì)細(xì)胞外基質(zhì)開始逐漸積聚，近曲腎小管上

7、皮細(xì)胞紛紛出現(xiàn)微絨毛脫落，細(xì)胞膜、細(xì)胞器開始紛紛碎裂，而腎間質(zhì)腫脹，炎性細(xì)胞浸潤等一系列變化；當(dāng)腎內(nèi)負(fù)壓吸引力維持在-20mmHg時，近曲小管、腎間質(zhì)細(xì)胞外的基質(zhì)積聚，近曲腎小管上皮細(xì)胞開始出現(xiàn)微絨毛脫落，細(xì)胞膜、細(xì)胞器均紛紛開始碎裂，腎間質(zhì)明顯腫脹；炎性細(xì)胞被浸潤。且以上病理變化隨著時間的積累，而逐漸加重。當(dāng)腎內(nèi)負(fù)壓吸引力維持超過30分鐘，腎內(nèi)負(fù)壓吸引力持續(xù)低于-15mmHg，負(fù)壓吸引側(cè)的實驗豬腎臟的TNF-α和TGF-β1的表達(dá)水平

8、，是顯著低于對側(cè)腎臟的（P<0.05）。
　　結(jié)論：
　　當(dāng)腎內(nèi)正壓灌注壓力持續(xù)超過100mmHg時，在時間的不斷積累的情況下，近曲小管、腎皮質(zhì)和腎間質(zhì)均出現(xiàn)損傷；在腔鏡手術(shù)時，應(yīng)保持低壓操作以及管道通暢，避免腎內(nèi)正壓灌注壓力持續(xù)超過100mmHg，降低對腎組織的損傷。
　　當(dāng)腎內(nèi)負(fù)壓吸引力持續(xù)低于-15mmHg時，在時間的不斷積累的情況下，近曲小管、腎實質(zhì)、腎間質(zhì)均出現(xiàn)損傷。當(dāng)需要進行負(fù)壓吸引操作（吸小石、碎石，吸膿