糖基化基質(zhì)影響人皮膚成纖維細(xì)胞增殖凋亡的研究.pdf

1、一、研究背景 皮膚組織的正常代謝和創(chuàng)面愈合的有序過程是細(xì)胞和細(xì)胞外基質(zhì)之間相互影響的結(jié)果。糖尿病狀態(tài)下源于糖代謝紊亂的基質(zhì)糖基化改變使細(xì)胞所處微環(huán)境異常，可能是修復(fù)細(xì)胞生物學(xué)行為變化的重要原因。 二、研究目的 闡述糖尿病皮膚組織和潰瘍創(chuàng)面中細(xì)胞增殖凋亡狀態(tài)；通過體外建立糖基化ECM模型模擬細(xì)胞的生存環(huán)境，了解皮膚微環(huán)境改變與細(xì)胞增殖凋亡調(diào)控之間的相關(guān)性；明確糖基化基質(zhì)對(duì)細(xì)胞增殖凋亡事件的調(diào)控效應(yīng)和作用環(huán)節(jié)，從而在

2、細(xì)胞增殖凋亡調(diào)控環(huán)節(jié)上對(duì)糖尿病皮膚“隱性損害”及創(chuàng)面修復(fù)延遲的機(jī)制進(jìn)行初步探討三、研究?jī)?nèi)容： 1．糖尿病皮膚組織及潰瘍創(chuàng)面細(xì)胞的增殖凋亡狀態(tài) 觀察正常人和糖尿病患者皮膚和創(chuàng)面組織的組織學(xué)表現(xiàn)；檢測(cè)皮膚和創(chuàng)面組織PCNA、cyclinBl和凋亡細(xì)胞表達(dá)；測(cè)定皮膚組織中p53、Bcl-2和Bax的含量。 2．糖基化基質(zhì)體外模型的建立及其對(duì)人皮膚成纖維細(xì)胞增殖凋亡的影響組織標(biāo)本檢測(cè)AGE分布；糖基化基質(zhì)體外模型的建立和

3、鑒定及其對(duì)FB存活率，細(xì)胞周期和凋亡的影響。 3．糖基化基質(zhì)影響人皮膚成纖維細(xì)胞增殖凋亡的機(jī)制研究組織標(biāo)本檢測(cè)RAGE、p-ERKl／2和p-p38的表達(dá)；根據(jù)接種于對(duì)照或糖基化基質(zhì)，是否用RAGE抗體或U0126或SB203580干預(yù)，分成不同的組別，測(cè)定細(xì)胞存活率，細(xì)胞周期和凋亡；細(xì)胞p-ERKl／2、p-p38、p53、Bax、Bcl-2的蛋白表達(dá)以及cyclinDl、cyclinBl、P53和P21的mRNA表達(dá)水平四、

4、研究結(jié)果和結(jié)論： 1. 無外源性損傷時(shí)，糖尿病皮膚組織中凋亡細(xì)胞增加，相關(guān)的凋亡調(diào)控蛋白表達(dá)異常；糖尿病潰瘍創(chuàng)面中修復(fù)細(xì)胞的增殖能力明顯減弱和凋亡細(xì)胞的增加，可能是糖尿病創(chuàng)面肉芽形成障礙的原因之一。 2. 糖尿病皮膚組織中糖基化ECM蓄積，真皮細(xì)胞表面RAGE表達(dá)增強(qiáng)，糖基化基質(zhì)經(jīng)RAGE介導(dǎo)上調(diào)p53和p21基因表達(dá)影響細(xì)胞周期的有序運(yùn)行，調(diào)控Bcl-2家族蛋白的表達(dá)促進(jìn)細(xì)胞凋亡；皮膚組織中糖基化ECM蓄積是細(xì)胞功能