8周有氧運動對大鼠右心室肌蛋白質(zhì)組差異表達的影響.pdf

1、目的：心肌蛋白質(zhì)是心臟結(jié)構(gòu)和功能的基礎(chǔ)，長期系統(tǒng)的運動訓練可使心肌結(jié)構(gòu)和功能發(fā)生變化，這必然導致心肌蛋白質(zhì)的表達量和質(zhì)發(fā)生變化。本研究從蛋白質(zhì)組學整體、定量的角度，探討SD大鼠在8周中小強度有氧運動條件下，右心室肌蛋白質(zhì)組的差異表達及其規(guī)律，初步篩選出在運動應(yīng)激條件下對心臟重塑發(fā)揮重要作用的目標蛋白質(zhì)。為深入研究國民體質(zhì)健康的運動干預(yù)，也為慢性心血管疾病的運動康復(fù)提供實驗依據(jù)。
　　 方法：以20只雄性SD大鼠為研究對象，按照體

2、重隨機分為運動組和對照組(n=10)。運動組經(jīng)8周中小強度有氧運動跑臺訓練后6h，與對照組同時麻醉處死，提取右心室肌的全蛋白進行雙向凝膠電泳技術(shù)分離；運用Bio PD quest圖像分析軟件對雙向凝膠電泳圖譜進行分析，選取運動后差異表達量≥5倍的蛋白質(zhì)點，用串聯(lián)飛行時間質(zhì)譜蛋白質(zhì)儀進行質(zhì)譜鑒定，以逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)對目標蛋白質(zhì)的基因表達進行mRNA轉(zhuǎn)錄水平上的檢測。
　　 結(jié)果：經(jīng)過8周運動后，與對照組相比運動組

3、心臟重量指數(shù)增加32.0％，具有顯著性差異(p＜0.05)。2-DE圖譜上8周運動組和對照組檢測到的蛋白質(zhì)點分別為547±18和530±14個；運動后共有58個蛋白質(zhì)點發(fā)生了變化，其中表達量上調(diào)≥2倍的點有33個，上調(diào)≥5倍的點有8個，下調(diào)≥2倍的點有25個，下調(diào)≥5倍的點有8個。選擇差異表達量≥5倍的16個點為目標蛋白質(zhì)進行質(zhì)譜分析，共鑒定出11個蛋白質(zhì)，這些目標蛋白質(zhì)點有：心肌肌動蛋白α1運動后表達量上調(diào)9.5倍、膜聯(lián)蛋白A6運動后

4、表達量上調(diào)5.4倍、丙酮酸脫氫酶E1α1運動后表達量上調(diào)5.3倍、原肌球調(diào)節(jié)蛋白4運動后表達量上調(diào)5.5倍、蛋白組氨酸磷酸酶運動后表達量上調(diào)9.6倍、次黃嘌呤鳥嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶運動后表達量下調(diào)9.7倍、線粒體羧甲基烯酰-CoAβ鏈運動后表達量下調(diào)14.6倍、線粒體電子轉(zhuǎn)移黃素蛋白β亞基運動后表達量下調(diào)16.1倍、線粒體?；o酶脫氫酶長鏈運動后表達量下調(diào)16.7倍、線粒體烏頭酸水合酶運動后表達量下調(diào)11.3倍和一個分子量29kDa的未知

5、蛋白運動后表達量上調(diào)5.3倍。逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈檢測結(jié)果顯示：膜聯(lián)蛋白A6、心肌肌動蛋白α1、蛋白組氨酸磷酸酶、線粒體羧甲基烯酰-CoAβ鏈、次黃嘌呤鳥嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶、線粒體酰基輔酶脫氫酶長鏈的mRNA表達量出現(xiàn)下降；線粒體烏頭酸水合酶、原肌球調(diào)節(jié)蛋白4的mRNA的表達量出現(xiàn)上升。
　　 結(jié)論：①經(jīng)過8周中小強度有氧運動后，大鼠右心室肌蛋白質(zhì)組發(fā)生了顯著性差異表達。②采用中小強度有氧運動，心肌收縮能力增強，能量代謝水平和鈣離子調(diào)