運(yùn)動(dòng)性疲勞對(duì)大鼠骨骼肌蛋白質(zhì)組表達(dá)譜影響的研究.pdf

1、分析運(yùn)動(dòng)疲勞對(duì)大鼠大腿骨骼肌蛋白組表達(dá)譜的影響，尋找新的與運(yùn)動(dòng)疲勞相關(guān)的蛋白質(zhì)，以期對(duì)運(yùn)動(dòng)疲勞的產(chǎn)生機(jī)制作進(jìn)一步的探討。 方法： 本研究采用比較蛋白質(zhì)組學(xué)方法，研究運(yùn)動(dòng)疲勞對(duì)大鼠后肢大腿骨骼肌蛋白質(zhì)組表達(dá)譜的影響。以游泳方式建立大鼠運(yùn)動(dòng)疲勞模型，利用動(dòng)物行為學(xué)和生物化學(xué)方法對(duì)模型的可信度進(jìn)行驗(yàn)證。 建模結(jié)束后，研磨法提取蛋白質(zhì)，用Lowry法測(cè)定蛋白總量，進(jìn)行二維電泳分離，通過(guò)計(jì)算機(jī)圖像分析，尋找差異性蛋白質(zhì)，將

2、差異性蛋白質(zhì)點(diǎn)分別進(jìn)行質(zhì)譜分析，經(jīng)數(shù)據(jù)庫(kù)查詢，初步鑒定出這些差異蛋白。 研究結(jié)果： 1．利用動(dòng)物行為學(xué)和生物化學(xué)方法對(duì)運(yùn)動(dòng)模型進(jìn)行觀察、檢測(cè)。發(fā)現(xiàn)大鼠神情倦怠，雙眼暗淡無(wú)光，皮毛蓬亂枯槁，片狀脫落，食欲下降，對(duì)外界刺激反應(yīng)遲鈍，逃避和探究行為減少，運(yùn)動(dòng)能力下降，體重減輕，第7天和第10天較對(duì)照組明顯下降，存在顯著性差異。大鼠血尿素含量即刻組和12小時(shí)組與對(duì)照組相比增高，存在差異。 結(jié)果提示：大鼠十天遞增負(fù)荷游泳運(yùn)

3、動(dòng)造成的動(dòng)物疲勞狀態(tài)與運(yùn)動(dòng)員生化指標(biāo)變化基本相似，說(shuō)明本實(shí)驗(yàn)提供的動(dòng)物模型是可靠的。 2．經(jīng)二維電泳分離，以及計(jì)算機(jī)圖像分析，發(fā)現(xiàn)：在實(shí)驗(yàn)組有12個(gè)蛋白發(fā)生明顯的變化(蛋白質(zhì)濃度相差3倍以上)，其中9個(gè)蛋白質(zhì)表達(dá)下調(diào)，3個(gè)蛋白質(zhì)表達(dá)上調(diào)。 3．經(jīng)質(zhì)譜分析，數(shù)據(jù)庫(kù)查詢，初步鑒定出這些差異蛋白： (1)3個(gè)表達(dá)上調(diào)的蛋白質(zhì)中有兩個(gè)是同一個(gè)蛋白質(zhì)--肌球蛋白巰解輕鏈，另一個(gè)是肌球蛋白輕鏈1，都屬于肌球蛋白輕鏈；

4、 (2)9個(gè)表達(dá)下調(diào)的蛋白質(zhì)：三磷酸甘油醛脫氫酶，β-烯醇化酶，肌酸激酶M鏈，ATP-AMP轉(zhuǎn)化酶，肌球蛋白重鏈，肌動(dòng)蛋白，快速骨骼肌型肌鈣蛋白I，快速骨骼肌型肌鈣蛋白T，未知蛋白R(shí)IKEN cDNA 1700001F09[Mus musculus]。 結(jié)論： 1、十天遞增負(fù)荷游泳運(yùn)動(dòng)所建的運(yùn)動(dòng)疲勞模型，動(dòng)物行為學(xué)特征和生化指標(biāo)與運(yùn)動(dòng)員在運(yùn)動(dòng)中出現(xiàn)的運(yùn)動(dòng)疲勞狀態(tài)時(shí)的特征相吻合，說(shuō)明本實(shí)驗(yàn)所建立的運(yùn)動(dòng)疲勞模型是可靠的。

5、 2、表達(dá)下調(diào)的蛋白質(zhì)中，4個(gè)酶(GAPDH；M-CK；Beta enolase；ATP-AMP轉(zhuǎn)化酶)與運(yùn)動(dòng)疲勞時(shí)骨骼肌能量代謝失衡，代謝產(chǎn)物堆積以及機(jī)體的調(diào)節(jié)失衡有關(guān)。4個(gè)是骨骼肌收縮蛋白(MHC；actin；fsTnl；TnTF)，可能是長(zhǎng)時(shí)間劇烈運(yùn)動(dòng)導(dǎo)致骨骼肌蛋白質(zhì)降解增加。另外一個(gè)是RIKEN cDNA 1700001F09是新蛋白，目前尚未報(bào)道。表達(dá)上調(diào)的蛋白質(zhì)(MLC<,1>、DTNB)，可能與運(yùn)動(dòng)疲勞時(shí)機(jī)體酸性代謝產(chǎn)