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1、中文 中文 3750 字, 字,2400 單詞, 單詞,1.3 萬(wàn)英文字符 萬(wàn)英文字符出處: 出處:Elsayed Z M, Abouel H S. Clinical evaluation of Gen-Probe's amplified mycobacterium tuberculosis direct test for rapid diagnosis of Mycobacterium tuberculosis in Egyp
2、tian children at risk for infection.[J]. Archives of Pathology Samir Abou-El Hassan摘要 摘要內(nèi)容:結(jié)核病(TB)的診斷檢測(cè)實(shí)驗(yàn)已大為改善。樣品處理后 4 至 7 小時(shí)內(nèi),我們就可以得到可靠的合理的,標(biāo)準(zhǔn)化的,基于核酸的擴(kuò)增技術(shù)的檢測(cè)結(jié)果,目的:研究抗酸涂片檢查陽(yáng)性或陰性的埃及高結(jié)核感染風(fēng)險(xiǎn)兒童的 BACTEC 460 TB 培養(yǎng)比較基因芯片法檢測(cè)結(jié)
3、核分枝桿菌的診斷效能。設(shè)計(jì)前瞻性評(píng)估了 50 個(gè)陽(yáng)性結(jié)核病史的家庭孩子。所有患者均來自埃及曼蘇拉大學(xué)兒童醫(yī)院門診。孩子們 PPD 試驗(yàn)硬結(jié)直徑超過 10 毫米,并在過去兩年內(nèi)接種卡介苗疫苗疤痕。每個(gè)病人連續(xù)取三個(gè)痰標(biāo)本。對(duì)樣品進(jìn)行了基因芯片法檢查,直接涂片鏡檢,細(xì)菌培養(yǎng) BACTEC 460 TB。結(jié)果: 50 例中,有 30(60%)的痰標(biāo)本呈 BACTEC 460 TB 陽(yáng)性反應(yīng), 29 例(58%)基因芯片法呈陽(yáng)性??顾?/p>
4、涂片檢查的敏感性和特異性分別為 83.3%和 100%,準(zhǔn)確度均為 90%。基因芯片法的敏感度和特異度分別為 96.7%和 100%,準(zhǔn)確度 98%。結(jié)論:本研究結(jié)果表明,基因芯片法檢測(cè)兒童結(jié)核病呼吸道樣本中的結(jié)核分枝桿菌復(fù)合物是一種快速、精確的方法,它可以用來診斷涂片陰性的疑似結(jié)核病人。前言 前言兒童結(jié)核?。═B)在與成人結(jié)核患者接觸的兒童中發(fā)病率最高。本研究的動(dòng)機(jī)是觀察到兒童結(jié)核病例的數(shù)量正在增加。傳統(tǒng)分枝桿菌培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)室診斷通常需
5、要 2 至 8 周。近期增加新的結(jié)核病例表明,急需新的快速,特異的診斷檢測(cè)結(jié)核分枝桿菌的方法。隨著新的分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展,相信不就就會(huì)到來。核酸擴(kuò)增檢測(cè)是快速的和明確的。盡管理論上能夠探測(cè)到甚至一個(gè)單一的分枝桿菌細(xì)胞,但不知核酸擴(kuò)增試驗(yàn)(核酸擴(kuò)增試驗(yàn))是否足夠可靠到可以取代傳統(tǒng)的診斷方法檢測(cè)結(jié)核。此試驗(yàn)的特點(diǎn)和測(cè)試程序中的錯(cuò)誤可能造成不準(zhǔn)確。此外,在呼吸道分泌物的酶,能夠抑制擴(kuò)增反應(yīng)造成額外的 3%至 25%的假陰性結(jié)果的存在。另一方
6、面,出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果通常由于陰性樣品的污染與任何生物或靶 DNA 從含有大量分枝桿菌的樣品或從擴(kuò)增子在實(shí)驗(yàn)室房間污染。為了克服這些問題,開發(fā)出更強(qiáng)大的標(biāo)準(zhǔn)化程序和樣品處理,擴(kuò)增及檢測(cè)試劑使用自動(dòng)化商業(yè)系統(tǒng)。各種自動(dòng)化系統(tǒng),擴(kuò)增和檢測(cè)技術(shù)的基礎(chǔ)上,已經(jīng)設(shè)計(jì)出用于檢測(cè)臨床樣品中的結(jié)核分枝桿菌。該系統(tǒng)包括基于聚合酶鏈反應(yīng) COBAS AMPLICOR 系統(tǒng)分枝桿菌(羅氏診斷,巴塞爾,瑞士)轉(zhuǎn)錄介導(dǎo)的,基于擴(kuò)增,擴(kuò)增結(jié)核分枝桿菌直接試驗(yàn)(AMTD
7、 Gen-Probe 公司,公司,圣地亞哥,加州)的 8 鏈置換擴(kuò)增基于 BD ProbeTec 的 ET 系統(tǒng)(碧迪公司,新澤西州富蘭克林湖)9 ;和連接酶鏈反應(yīng)為基礎(chǔ)的雅培 LCX 結(jié)核分枝桿菌檢測(cè)系統(tǒng)(雅培,北芝加哥,Ⅲ)。由 Gen-Probe 公司 AMTD 檢測(cè)通過使用特定的 RNA 轉(zhuǎn)錄介導(dǎo)的等溫?cái)U(kuò)增方法。這項(xiàng)工作的目的是研究基因芯片技術(shù)直接檢測(cè)結(jié)核分枝桿菌比較 BACTEC 460 TB 培養(yǎng)檢查對(duì)抗酸(ZN)涂片陰性或
8、陽(yáng)性埃及高結(jié)核感染風(fēng)險(xiǎn)兒童的診斷性能。材料與方法 材料與方法病人的選擇 病人的選擇本研究前瞻性評(píng)估了 50 個(gè)孩子,介于 10 至 15 歲的陽(yáng)性結(jié)核病史的家庭。所有患者均來自埃及曼蘇拉大學(xué)兒童醫(yī)院門診。孩子們具有咳嗽癥狀。他們 PPD 陽(yáng)性,結(jié)果為直徑超過 10 毫米的硬結(jié),并在過去2 年接種過卡介苗(BCG)。獲得所有參與者的父母知情的書面同意,曼蘇拉大學(xué)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)了這項(xiàng)研究。在美國(guó)[17]報(bào)道 TB 幼兒中心爆發(fā),因?yàn)樵趫?chǎng)
9、的成年人患有結(jié)核病。與家人密切的互動(dòng)成為延誤診斷結(jié)核病傳染給孩子的主要途徑。小兒結(jié)核病的增加需要我們提高臨床診斷能力。改善結(jié)核病控制和針對(duì)性的宣傳計(jì)劃,在埃及高風(fēng)險(xiǎn)的移民人口可能會(huì)增加兒童和成人的病例,需要一個(gè)有效的檢測(cè)方法來診斷和治療結(jié)核病。在本研究中一個(gè)有趣的發(fā)現(xiàn)是,所有陽(yáng)性 X 射線檢查結(jié)果的患者的也有陽(yáng)性的培養(yǎng)。然而,X-射線發(fā)現(xiàn)異常的患者中只有 40%。同樣,Swingler 等[19]報(bào)道,在兒童結(jié)核病的診斷與檢測(cè)縱隔淋巴結(jié)
10、腫大的準(zhǔn)確性是值得商榷的。因此,我們必須選擇更精確的方法,以免誤診那些病人。當(dāng)評(píng)估 ZN 涂抹作為一個(gè)快速和廉價(jià)的結(jié)核病診斷方法的性能,特異度為 100%,敏感度為 83.3%,90%的整體精度。雖然結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)被認(rèn)為是黃金標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法,但顯微鏡足夠迅速,在 24 小時(shí)內(nèi)提供結(jié)果,可是,后者缺乏敏感性且無法分辨其他分枝桿菌結(jié)核菌?;蛐酒ㄅc培養(yǎng)結(jié)果相比,29 例基因芯片法培養(yǎng)陽(yáng)性,1 例基因芯片法陰性培養(yǎng)陽(yáng)性。4 個(gè)樣品培養(yǎng)和基因
11、芯片法及 AFB 涂片均呈陽(yáng)性的。一般來說,陽(yáng)性和陰性對(duì)照和標(biāo)本的臨界值之間的差異是不夠明顯。這解釋了培養(yǎng)陽(yáng)性標(biāo)本的基因芯片法結(jié)果陰性,可能因?yàn)樯贁?shù)分枝桿菌的分布不均,很顯然,基因芯片法技術(shù)增加了診斷結(jié)核病的百分比。格雷科等[ 23]報(bào)道了類似的結(jié)論,對(duì)于大多數(shù)的自動(dòng)化系統(tǒng)。根據(jù) AFB 涂片的結(jié)果,患者預(yù)后的影響會(huì)有所不同。在涂片陽(yáng)性的患者,主要是影響公眾健康和醫(yī)院感染控制資源措施。AFB 涂片陰性時(shí),影響患者預(yù)后的潛力更大。在涂片陰
12、性的患者,基因芯片法可以提供更快速診斷結(jié)核病和隨后開始治療,這避免了需要侵入性的診斷方法,并允許住院患者提前出院,這些侵入性診斷方法是昂貴的,會(huì)對(duì)病人構(gòu)成風(fēng)險(xiǎn)。因此,在發(fā)展中國(guó)家,如埃及,我們可以對(duì)疑似病例開展基因芯片法檢查,降低診斷費(fèi)用。培養(yǎng)與涂片檢查的成本是 25 元左右,基因芯片法每箱成本為 50 美元左右。我們得出的數(shù)據(jù),顯示了基因芯片法出色的靈敏度和特異度?;蛐酒y(cè)試的靈敏度為 96.7%,特異度為 100%,陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為
13、 100%,陰性預(yù)測(cè)值為 95.2%,準(zhǔn)確度為 98%。涂片陰性樣品敏感性為80%。王和泰有類似的報(bào)道,基因芯片法的靈敏度為 98.4%,特異度為 100%,陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為 100%。在本研究中,基因芯片法結(jié)果證明,對(duì)于結(jié)核高風(fēng)險(xiǎn)兒童,作為一種快速,準(zhǔn)確診斷肺結(jié)核的方法是有價(jià)值的。其結(jié)果可在 4 小時(shí)內(nèi)得到,而培養(yǎng)結(jié)果可能在 14 天內(nèi)獲得。我們可以不依賴于 ZN 單獨(dú)作為一個(gè)快速的方法,因?yàn)樗撵`敏度很低。在埃及的情況下,控制結(jié)核病接觸
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