恥垢分枝桿菌與結核分枝桿菌抗原的交叉免疫反應研究.pdf

1、目的：
　　探討恥垢分枝桿菌（Mycobacteria smegmatis，MS）與結核分枝桿菌（Mycobacteria tuberculosis，MTB）共同抗原及其免疫原性,為恥垢分枝桿菌作為結核潛在疫苗的研究提供科學依據(jù)。
　　方法：
　　以低溫超聲破碎、活菌碾磨破碎兩種方法提取MS和MTB菌體抗原，以及自己收集的培養(yǎng)后期上清濾液蛋白，通過Western blot觀察菌體抗原與抗血清的免疫交叉反應。將MS超聲破

2、碎抗原和 MTB超聲破碎抗原分別與不完全弗氏佐劑混勻后肌肉注射于小鼠，免疫不同次數(shù)后7天，以Elispot技術檢測小鼠脾臟淋巴細胞經(jīng)不同細菌抗原分別刺激后能產(chǎn)生抗原特異性IFN-γ的淋巴細胞水平，流式細胞學技術檢測各類細胞因子水平，ELISA技術檢測血清中抗體效價水平。
　　結果：
　　Western blot結果顯示MS與MTB間存在一些主要分布在10-100KD的共同抗原，能與兩細菌的抗血清產(chǎn)生較強的交叉免疫反應；ELI

3、SPOT及流式細胞學結果顯示經(jīng)兩細菌分別致敏的小鼠均能兩種分枝桿菌抗原產(chǎn)生以細胞免疫為主的免疫應答，隨免疫次數(shù)的增加免疫反應也增強，免疫兩針接近高峰，免疫三針達到平衡并出現(xiàn)機體免疫系統(tǒng)的平衡調(diào)節(jié)。CD4+T及CD8+T淋巴細胞分泌IL-2、IFN-γ水平均明顯高于未免疫組(P＜0.05),且對非分枝桿菌屬的布氏桿菌對照抗原幾乎不產(chǎn)生細胞免疫應答。ELISA結果顯示兩細菌抗原分別免疫的小鼠血清中含有大量能與共同抗原特異性結合的抗體，并且隨