kv1.5及凋亡相關(guān)蛋白在氟西汀抗大鼠肺動脈高壓作用中的機(jī)制研究

1、中國醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文Kv1.5及凋亡相關(guān)蛋白在氟西汀抗大鼠肺動脈高壓作用中的機(jī)制研究姓名：翟鳳國申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：藥理學(xué)指導(dǎo)教師：王懷良20090401所調(diào)控。其中，5 一羥色胺( 5 - h y d r o x y t r y p t a m i n e , 5 - H T ) 是一個強(qiáng)有力的血管收縮因子和促有絲分裂因子，在P A H 發(fā)病機(jī)制中具有重要作用。研究發(fā)現(xiàn)，肺動脈高壓患者血漿中5 ．H T 水平明顯高于正常人，體

2、外實(shí)驗(yàn)證明高濃度的5 ．H T 能使人離體肺血管明顯收縮。5 - H T 可經(jīng)細(xì)胞膜上的5 一羥色胺轉(zhuǎn)運(yùn)體( 5 ．h y d r o x y t r a p t a m i n et r a n s p o r t e r , 5 - H 1 1 ．) 介導(dǎo)進(jìn)入肺動脈平滑肌細(xì)胞，并通過多種增殖信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑引起P A S M C s 增殖肥大，導(dǎo)致肺血管構(gòu)型重建。5 - H T 也可以抑制K v l ．5 電流。此外，肺動脈高壓患者肺動

3、脈中5 ．H T T 表達(dá)增加，暴露在低氧條件下的P A S M C s5 ．H T Tm R N A 表達(dá)也增加。越來越多的研究結(jié)果表明5 ．羥色胺和5 ．羥色胺轉(zhuǎn)運(yùn)體在肺動脈高壓發(fā)病機(jī)制中起關(guān)鍵作用。選擇性5 ．羥色胺再攝取抑制劑( S S R I s ) 包括氟西汀、舍曲林、帕羅西汀、西肽普蘭等，是近年來臨床常用的抗抑郁癥藥物。它們通過阻斷突觸前膜上的5 ．H T T ，抑制5 - H T 再攝取，提高突觸間隙5 - H T 濃度

4、，從而發(fā)揮治療作用。我們最近報道了氟西汀可在體外抑制5 - H T 介導(dǎo)的肺動脈平滑肌細(xì)胞增殖。也有研究表明氟西汀可抑制5 ．羥色胺對肺動脈平滑肌細(xì)胞K v 電流的影響并抑制肺血管收縮。此外，氟西汀也保護(hù)慢性低氧誘導(dǎo)的肺血管構(gòu)型重建和肺動脈高壓。氟西汀抗肺動脈高壓的作用是否與它對K v l ．5 通道及肺動脈平滑肌細(xì)胞增殖和凋亡的調(diào)控有關(guān)均不清楚。因此在本研究中，我們通過建立野百合堿( M C T )誘導(dǎo)的慢性大鼠肺動脈高壓模型來觀察肺

5、動脈平滑肌細(xì)胞的增殖、凋亡和K v l ．5在M C T 誘導(dǎo)的肺動脈高壓中的作用，并探討氟西汀抗肺動脈高壓作用是否與這些因素有關(guān)。實(shí)驗(yàn)方法( 一) 建立肺動脈高壓大鼠模型體重( 1 6 0 4 - l O g ) 的雄性W i s t a r 大鼠8 0 只( 中國醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心，G r a d eI I ，C e r t i f i c a t eN o ．0 3 4 ) ，隨機(jī)分成4 組：對照組( c o n t r 0 1

6、 ) 、M C T 組、M C T + 氟西汀2 m g ／k g 劑量組( M C T + F 2 ) 和M C T + 氟西汀1 0 m g ／l 【g 劑量組( M C T + F 1 0 ) 。M C T組、M C T + F 2 組和M C T + F 1 0 組大鼠一次性腹腔內(nèi)注射M C T 6 0 m g ／k g ，對照組注射同等劑量的溶劑。繼而，M C T + F 2 組和M C T + F 1 0 組大鼠每天分別給予