麥稈提取物的體外抑瘤活性研究.pdf

1、我國麥稈資源十分豐富，除用作畜牧飼料、還田肥料和工業(yè)原料外，大都直接大量焚燒，既造成能源的浪費(fèi)，又引起嚴(yán)重的環(huán)境污染。綜合利用農(nóng)作物秸稈成為當(dāng)前國內(nèi)外科學(xué)家競相開展的研究課題。據(jù)資料和研究推測麥稈中可能存在抗癌活性成分。本研究旨在以麥稈為原料，提取其中的抗癌活性成分或能提高機(jī)體免疫力的低聚糖等高附加值成分，為有效利用麥稈資源，杜絕其對(duì)環(huán)境的污染做出積獻(xiàn)。
　　 本文先用超臨界提取技術(shù)對(duì)麥稈可能存在的弱極性抗癌活性成分進(jìn)行粗提取，

2、研究其最佳工藝和粗提物的體外抑瘤活性;用超臨界提取后的麥稈，再提取其中可能存在的極性活性成分，研究其最佳工藝和粗提物的體外抑瘤活性。將活性較高的超臨界粗提物進(jìn)行進(jìn)一步分離，用乙醇、正丁醇、乙酸乙酯和正己烷等有機(jī)溶劑復(fù)溶并做體外抑瘤活性測定后，選擇活性較好的復(fù)溶物用透析、活性炭吸附和冷析的方法分離，得到數(shù)種分離組分并對(duì)其作體外抑瘤活性測定;選擇活性最好的分離組分通過硅膠柱層析進(jìn)一步分離，得到數(shù)種柱層析分離組分并對(duì)其作體外抑瘤活性測定;選擇

3、活性最高的柱層析分離組分進(jìn)行GC-MS分析，并做了其抗腫瘤效果評(píng)價(jià)。
　　 結(jié)果如下:
　　 1.超臨界工藝及粗提物的體外抑瘤活性:
　　 超臨界提取最佳工藝為:萃取壓力25MPa、萃取溫度50℃、二氧化碳流量35kg/h以及萃取時(shí)間2h;超臨界粗提物得率達(dá)到3.6％，對(duì)小鼠S180細(xì)胞增殖顯示體外抑制作用，有一定的劑量—效應(yīng)關(guān)系(r=0.983)，IC50為200.6μg/mL。
　　 2.麥稈極性活性

4、成分的提取及粗提物的體外抑瘤活性:
　　 水溶性多糖提取最佳工藝為料液比1∶150(W∶V)，75℃浸提1h，粗提物得率為8.4％，無體外抑瘤活性;堿溶性多糖提取最佳工藝為料液比1∶150(W∶V)，75℃浸提3h，粗提物得率為22.7％，無體外抑瘤活性;有機(jī)酸提取最佳工藝為料液比為1∶150(W∶V)，pH=4.5，50℃提取2h，粗提物得率為1.02‰無體外抑瘤活性;生物堿提取最佳工藝為料液比1∶150(W∶V)，75℃浸提

5、1h，粗提物得率為1.5％,無體外抑瘤活性。
　　 3.超臨界粗提物的初步分離及分離組分的體外抑瘤活性:
　　 乙醇復(fù)溶物體外抑瘤活性較超臨界粗提物高，對(duì)小鼠S180細(xì)胞作用的IC50為163.6μg/mL;然后用冷析得到的分離組分Ⅱ抑瘤作用較組分Ⅰ好，對(duì)小鼠S180細(xì)胞作用的IC50為103.4μg/mL;透析分離組分Ⅰ的抑瘤作用較組分Ⅱ好，對(duì)小鼠S180細(xì)胞作用的IC50為135.5μg/mL;用活性炭吸附得到的分離

6、組分Ⅰ和Ⅱ的抑瘤作用較差;所以選取抑瘤活性最高的冷析分離組分Ⅱ進(jìn)一步分離。
　　 4.冷析分離組分Ⅱ的硅膠柱層析分離及體外抑瘤活性和GC-MS分析結(jié)果:
　　 冷析分離組分Ⅱ經(jīng)硅析柱膠層得到4種分離組分，其中層析組分1體外抑瘤效果最好，在5μg/mL～160μg/mL的范圍內(nèi)對(duì)S180細(xì)胞的增殖均有抑制作用，呈現(xiàn)出良好的劑量—效應(yīng)關(guān)系，IC50為68.0μg/mL;層析分離組分GC-MS測定結(jié)果表明，麥稈中可能存在的體外

7、抑瘤活性成分為亞麻酸，也可能有β-蒎烯和4，8，12，16-四甲基十七碳烷-4-交酯的作用。
　　 5.層析組分1的抗腫瘤效果評(píng)價(jià):
　　 MTT測定結(jié)果表明層析組分Ⅰ對(duì)人肝癌HepG2細(xì)胞增殖具有體外抑制作用，IC50為77.1μg/mL，顯示出明顯的劑量—效應(yīng)關(guān)系(r=0.992);流式細(xì)胞儀測定結(jié)果表明層析組分1對(duì)人肝癌HepG2細(xì)胞具有誘導(dǎo)凋亡作用;層析組分1對(duì)正常體細(xì)胞毒性較小，在68.0μg/mL劑量下處理小