CTB-CS3基因表達載體構建及對黃瓜的轉化.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、植物生物反應器是一種安全和廉價的蛋白生產(chǎn)系統(tǒng).但是其中一個限制因素是外源蛋白在值物中表達量低.為了優(yōu)化表達系統(tǒng),該試驗構建了分別將CTB/CS3蛋白定位于細胞質、細胞間質和內質網(wǎng)的pBinCTBatg/CStaa、pBinCTBsp/CStaa、pBinCTBsp/CSkdel植物表達載體及對照載體pBinCTBsp/CSkdel,分別通過農(nóng)桿菌介導法轉化煙草.對再生煙草進行PCR檢測,獲得了轉CTB/CS3基因植株.Western定量

2、分析結果顯示,將CTB/CS3定位于內質網(wǎng)的基因植株表達量遠遠高于其它類型轉基因煙草.為了使黃瓜作為生物反應器進行抗腹瀉口服疫苗的生產(chǎn),在該試驗中利用報告基因β-葡萄糖醛酸酶(GUS)對黃瓜品種649的遺傳轉化條件進行了優(yōu)化.在黃瓜轉化與再生過程中,選擇黃瓜子葉、子葉節(jié)作為外植體優(yōu)于下胚軸.與農(nóng)桿菌共培養(yǎng)過程中添加乙酰丁香酮(AS),共培養(yǎng)15min,分化培養(yǎng)基為MS+6-BA(1.0mg/L)+NAA(1.0mg/L)+kam(50m

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