羅氏沼蝦促性腺激素的分離純化及其生理功能檢測.pdf

1、本實(shí)驗(yàn)以羅氏沼蝦為研究對(duì)象，首先對(duì)其卵黃磷蛋白進(jìn)行了純化和多克隆抗體的制備，并且對(duì)其抗體進(jìn)行了效價(jià)測定和免疫檢測。結(jié)果表明，ELISA法確定抗體效價(jià)達(dá)1：20，000。免疫印跡結(jié)果顯示該抗體與日本沼蝦卵巢蛋白存在免疫交叉反應(yīng)，與羅氏沼蝦肌肉抽提液及斑節(jié)對(duì)蝦卵巢蛋白不存在免疫交叉反應(yīng)。說明制備的抗體具有特異性，能有效用于檢測Vn的含量；并且證明羅氏沼蝦與日本沼蝦卵巢蛋白存有一定同源性，與斑節(jié)對(duì)蝦卵巢蛋白差別較大?！　±弥苽涞腣n抗體以

2、及免疫沉淀的方法，對(duì)該蝦腦抽提液的SephadexG-50凝膠過濾層析及其高壓液相色譜層析(HPLC)的組分進(jìn)行活性檢測。同時(shí)比較了卵巢發(fā)育至Ⅲ期及其卵巢完全未發(fā)育的蝦腦層析波譜。結(jié)果表明，處于性腺發(fā)育期的蝦腦的小分子蛋白組分比未發(fā)育期蝦腦的相應(yīng)組分更為復(fù)雜。在HPLC之后得到的9個(gè)含量較高的蛋白峰之中，峰Ⅲ能夠非常顯著地特異性地促進(jìn)Vn的合成。　　目前，對(duì)于羅氏沼蝦的研究多集中在細(xì)胞學(xué)及其激素分泌，電生理學(xué)研究缺乏。利用全細(xì)胞膜片鉗