鹽酸文拉法辛膠囊在健康人體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)及生物等效性研究.pdf

1、抑郁癥（Depression）是一種常見的情感障礙性精神疾病，其臨床表現(xiàn)為情緒低落、悲觀、睡眠障礙等，嚴(yán)重者常出現(xiàn)自殺沖動(dòng)，是世界上最易致殘的疾病之一。世界衛(wèi)生組織（WHO）2005年統(tǒng)計(jì)，各種抑郁癥的患病率約占全球人口的11％。由此病所引起的醫(yī)療費(fèi)用的巨大開支，對(duì)社會(huì)和家庭都是一種沉重的負(fù)擔(dān)，給患者肉體和精神上帶來(lái)了很大的痛苦。因此，抗抑郁癥藥物的研制成為世界制藥工業(yè)的一個(gè)熱點(diǎn)。鹽酸文拉法辛屬于新型抗抑郁藥，臨床上常用于難治性抑郁癥的

2、治療，它能夠同時(shí)有效的抑制5-羥色胺和去甲腎上腺素的再攝取。與其它抗抑郁藥相比，病人耐受性良好，而且較少產(chǎn)生三環(huán)類藥物嚴(yán)重的心血管毒性，以及單胺氧化酶抑制劑類嚴(yán)重的藥物相互作用，目前得到越來(lái)越廣泛的應(yīng)用。根據(jù)我國(guó)藥品食品監(jiān)督管理局（SFDA）通過的《藥品注冊(cè)管理辦法》，鹽酸文拉法辛膠囊屬于六類藥，即仿制藥。對(duì)于此類藥，臨床試驗(yàn)要求口服固體制劑應(yīng)當(dāng)進(jìn)行生物等效性（BE）試驗(yàn)，即指在相同實(shí)驗(yàn)條件下給予相同劑量，其吸收速度與程度差異是否有統(tǒng)計(jì)

3、學(xué)意義。BE的研究反映了藥物制劑的生物學(xué)標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)臨床療效提供直接的證明。
　　目的：
　　建立高效液相色譜法（HPLC）測(cè)定人血漿中鹽酸文拉法辛濃度的方法，探討其在健康人體內(nèi)的吸收、分布、代謝和排泄的動(dòng)態(tài)變化特點(diǎn)。在此基礎(chǔ)上，以已上市的成都大西南制藥股份有限公司生產(chǎn)的博樂欣（鹽酸文拉法辛膠囊）為參比制劑，對(duì)四川禾正制藥有限責(zé)任公司仿制的鹽酸文拉法辛膠囊（受試制劑）進(jìn)行人體生物等效性評(píng)價(jià)，為該藥申報(bào)提供臨床資料；同時(shí)，為指導(dǎo)該

4、藥的臨床安全、合理用藥提供理論依據(jù)，也為同類藥物研究提供參考。
　　方法：
　　本研究分兩部分：
　　第一部分HPLC法測(cè)定人血漿中鹽酸文拉法辛濃度的方法學(xué)建立。
　　色譜條件：色譜柱：Diamonsil C18（250mm×4.6mm，5μm）；流動(dòng)相：乙腈-pH3.0磷酸鹽緩沖液-三乙胺（33.5:66.5:1，）（V/V/V）；流速：1.0mL·min-1；激發(fā)波長(zhǎng)：276nm，發(fā)射波長(zhǎng)：596nm；內(nèi)標(biāo)：

5、馬普替林；柱溫為室溫；進(jìn)樣量20μL。血漿樣品預(yù)處理方法：精取待測(cè)血漿樣品1.0mL于尖底10mL的具塞玻璃離心試管中，精密加入20μg·mL-1馬普替林儲(chǔ)備液20μL，然后精密加入0.1mol·L-1氫氧化鈉溶液0.2mL，混合后加入正己烷-異戊醇（98.5:1.5）的混合萃取液7mL，漩渦混合5min，離心5min（4,000r·min-1），取有機(jī)層，加0.05mol·L-1鹽酸溶液0.2mL，漩渦混合2min，離心5min（4,

6、000r·min-1）后，取水相20μL進(jìn)樣到HPLC系統(tǒng)，進(jìn)行血漿樣品文拉法辛濃度的測(cè)定。
　　第二部分研究鹽酸文拉法辛膠囊與博樂欣單劑量給藥在健康受試者體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)及生物等效性。
　　本試驗(yàn)采用標(biāo)準(zhǔn)二階段交叉設(shè)計(jì)自身對(duì)照試驗(yàn)方法，選取18名健康男性志愿受試者，隨機(jī)分成兩組。試驗(yàn)期間禁止劇烈活動(dòng)，禁止吸煙、飲酒或含藥物、酒精的飲料等。試驗(yàn)前18名受試者的血、尿常規(guī)、肝、腎功及心電圖檢查均正常，無(wú)神經(jīng)系統(tǒng)疾病及藥物過敏史

7、。按試驗(yàn)方案設(shè)計(jì)要求，18名受試者于試驗(yàn)前一天晚上19:00開始禁食，次晨采集服藥前靜脈血5mL，再分別單次口服受試制劑或參比制劑，于服藥后0.5、1、1.5、2、2.5、3、4、5、6、8、10、12、24、36h分別采取靜脈血5.0mL，離心分離出血漿置無(wú)菌試管中，于-20℃冷凍保存，待測(cè)。整個(gè)試驗(yàn)期間配備經(jīng)驗(yàn)的醫(yī)生、護(hù)士監(jiān)護(hù)。本試驗(yàn)采用內(nèi)標(biāo)法測(cè)定血漿樣品中鹽酸文拉法辛的濃度。Tmax、Cmax采用實(shí)測(cè)值，AUC用統(tǒng)計(jì)矩方法計(jì)算，將

8、血藥濃度時(shí)間數(shù)據(jù)經(jīng)DAS2.1.1藥代動(dòng)力學(xué)統(tǒng)計(jì)軟件處理，計(jì)算其它主要藥動(dòng)學(xué)參數(shù)。并利用DAS2.1.1統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行方差分析和雙單側(cè)t檢驗(yàn)及（1-2α）％置信區(qū)間法分析受試制劑與參比制劑是否具有生物等效性。
　　結(jié)果：
　　1.本試驗(yàn)條件下，HPLC的理論塔板數(shù)為4153，柱效良好。血漿中藥物和基線分離良好且選擇性高，在血漿濃度10～800ng·mL-1范圍內(nèi)與峰面積呈良好線性關(guān)系（r=0.999,n=6），標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為Y

9、=0.0040X+0.0323。最低定量限（LOQ）為10ng·mL-1。血漿中高、中、低三個(gè)濃度的方法回收率分別為(98.7±9.9)％、(112.6±1.3)％、(99.9±1.2)％，提取回收率分別為(91.08±8.29)％、(81.51±7.77)％、(88.16±8.19)％；日內(nèi)RSD分別為11.6％、3.1％、1.1％，日間RSD分別為8.0％、9.3％、4.3％。凍融試驗(yàn)在室溫24h內(nèi)和冰凍30d的RSD均小于10％。

10、
　　2.18名健康男性受試者單劑量口服鹽酸文拉法辛膠囊和博樂欣參比制劑100mg后，其主要藥動(dòng)學(xué)參數(shù)分別為Tmax(3.11±0.93)h和(3.00±0.80)h；Cmax(273.38±75.44)ng·mL-1和(297.24±127.14)ng·mL-1；AUC（0-36h）(2237.54±816.67)ng·h·mL-1和(2413.92±1004.73)ng·h·mL-1；AUC（0-∞）(2456.13±838.

11、30)ng·h·mL-1和(2699.26±1115.72)ng·h·mL-1；t1/2Ke(6.57±2.81)h和(6.89±2.25)h。
　　3.將主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換后進(jìn)行方差分析，結(jié)果顯示，兩種鹽酸文拉法辛膠囊制劑的AUC（0-36h）、AUC（0-∞）、Cmax和Tmax均無(wú)顯著性差異（P＞0.05），進(jìn)一步采用雙單側(cè)t檢驗(yàn)和（1-2α）％置信區(qū)間分析，AUC（0-36h）和Cmax均無(wú)顯著性差異（P＞0.05

12、），受試制劑AUC（0-36h）的90％置信區(qū)間為參比制劑相應(yīng)參數(shù)的86.4～105.7％，Cmax的90％置信區(qū)間為參比制劑相應(yīng)參數(shù)的80.7～114.2％。
　　4.所有受試者在整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間均未有任何不良反應(yīng)主訴，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后重新進(jìn)行體檢，所有體檢指標(biāo)均正常。
　　結(jié)論：
　　1.本試驗(yàn)建立的HPLC分析方法專屬性強(qiáng)、靈敏度高、準(zhǔn)確性好。該方法具有操作簡(jiǎn)便、快速、精密度和回收率高等特點(diǎn)，通過色譜圖分析，鹽酸文拉法辛周

13、圍無(wú)雜峰干擾且分離良好，所有效能指標(biāo)均符合關(guān)于進(jìn)行藥動(dòng)學(xué)及生物等效性研究的試驗(yàn)要求。
　　2.對(duì)受試鹽酸文拉法辛膠囊與參比制劑進(jìn)行了人體生物等效性評(píng)價(jià)，考察了Cmax，Tmax，AUC0→36，AUC0→∞，t1/2等指標(biāo)，獲得2000多個(gè)有效實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。結(jié)論為：兩種制劑在健康人體內(nèi)具有生物等效性，相對(duì)生物利用度為95.6％。研究結(jié)果表明：兩種制劑體內(nèi)代謝相似，可在臨床上安全有效地使用。
　　3.藥代動(dòng)力學(xué)研究結(jié)果闡明了文拉法