復(fù)方利福平雙釋放膠囊在中國健康人體內(nèi)的藥代動力學(xué)及生物等效性.pdf

1、目的：
　　本研究擬通過隨機、自身交叉對照設(shè)計法，研究抗結(jié)核的固定劑量復(fù)合制劑復(fù)方利福平雙釋放膠囊（受試制劑）與市售制劑（參比制劑）中利福平、異煙肼、吡嗪酰胺、鹽酸乙胺丁醇的相對生物利用度，以評價復(fù)方利福平雙釋放膠囊藥代動力學(xué)特性及與參比制劑是否生物等效，為臨床合理用藥提供理論依據(jù)，改善患者用藥的依從性，減少耐藥性的發(fā)生。
　　方法：
　　招募20例健康男性志愿者，隨機分為觀察組與對照組，每組各10例。觀察組服用12粒

2、復(fù)方利福平雙釋放膠囊，對照組服用參比制劑，1周后自身交叉服用另1種制劑。
　　單劑量組于服藥前采空白血，服藥后0.33、0.67、1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5、6、8、12、15、24和48h，各采集靜脈血4mL，置肝素試管中，輕輕搖勻，立即離心，分取血漿，置-30℃冰箱保存;于服藥后0-2、2-4、4-6、6-8、8-10、10-12、12-24、24-36、36-48h留尿，測量體積后，取50mL，置-3

3、0℃冰箱保存。
　　多劑量組于服藥前采空白血，連續(xù)給藥六天后采集血漿樣品和尿液，采血點及尿液收集時間同單劑量組，各劑量組生物樣品均于測定前自然解凍進行生物等效性研究。根據(jù)FDA生物樣品分析方法學(xué)指南，采用高效液相色譜法(High Performance Liquid Chromatography，HPLC)測定利福平、異煙肼和吡嗪酰胺的血藥濃度，紫外可見分光光度法(UV-visible Spectrophotometry，UV)測

4、定乙胺丁醇的尿藥濃度，考察復(fù)方利福平雙釋放膠囊中各組分在健康人血漿樣品的方法學(xué)特異性、精密度、準確度、線性、定量下限、生物基質(zhì)效應(yīng)、穩(wěn)定性和回收率等。所測得的數(shù)據(jù)經(jīng)3P97軟件進行統(tǒng)計分析處理，采用非房室模型法評估各項藥代動力學(xué)參數(shù)。
　　結(jié)果：
　　本試驗研究建立了人血漿中復(fù)方利福平雙釋放膠囊中各組分含量測定的定量分析方法，并進行在健康受試者體內(nèi)的藥代動力學(xué)研究及生物等效性評價。
　　HPLC法測定人血漿中利福平的濃

5、度，定量下限為0.24mg/L，線性范圍為0.24-63.29mg/L。HPLC法測定人血漿中異煙肼的濃度，定量下限為0.257mg/L，線性范圍為0.257-32.64mg/L。HPLC法測定人血漿中吡嗪酰胺的濃度，定量下
　　限為0.32mg/L，線性范圍為0.32-162.48mg/L。酸性染料比色法測定人尿中的鹽酸乙胺丁醇，定量下限為25.02mg/L，線性范圍為25.02-500.40mg/L。方法回收率和精密度均符合生

6、物樣品分析的要求。
　　單劑量組結(jié)果:復(fù)方利福平雙釋放膠囊受試制劑和參比制劑的實測利福平的Tmax分別為(4.15±0.80)和（2.03±0.73）h，實測Cmax分別為（10.83±1.47）和（10.94±1.82）mg/L，梯形法算得AUC0-t分別為（89.77±15.43）和（71.78±14.01）mg·h/L，AUC0-∞分別為（93.93±15.69）和(77.04±14.96)mg·h/L。以市售制劑為參比，復(fù)

7、方利福平雙釋放膠囊中的利福平的生物利用度F1為（126.80±18.20）％;F2為（124.01±18.11）％，經(jīng)方差分析和雙單側(cè)t檢驗證明，兩種制劑中的利福平生物不等效，且Tmax亦有顯著差異。實測異煙肼的Tmax分別為（0.77±0.51）和(0.79±0.46)h，實測Cmax分別為（4.44±1.45）和(4.22±1.42)mg/L，梯形法算得AUC0-t分別為（12.40±5.32）和（11.49±5.20）mg·h/L

8、，AUC0-∞分別為（13.33±5.47）和（13.60±9.58）mg·h/L。以市售制劑為參比，復(fù)方利福平雙釋放膠囊中的異煙肼的生物利用度F1為（109.9±14.2）％;F2為（106.9±18.1）％，經(jīng)方差分析和雙單側(cè)t檢驗證明，兩種制劑中的異煙肼具有生物等效性。實測吡嗪酰胺的Tmax分別為（1.47±0.45）和（1.35±0.48）h，實測Cmax分別為（35.99±4.63）和（32.80±3.69）mg/L，梯形法算

9、得AUC0-1分別為（555.46±76.81）和(481.70±74.03)mg·h/L，AUC0-∞分別為（574.93±82.06）和（498.22±79.40）mg·h/L，以市售制劑為參比，復(fù)方利福平雙釋放膠囊中的吡嗪酰胺的生物利用度F1為（116.80±17.5）％，F(xiàn)2為（117.00±18.01）％，經(jīng)方差分析和雙單側(cè)t檢驗證明，兩種制劑中的吡嗪酰胺具有生物等效性。受試制劑和參比制劑的實測尿中鹽酸乙胺丁醇的累積排泄率分別

10、為（68.58±21.19）％和（67.69±18.70）％，以市售制劑為參比，復(fù)方利福平雙釋放膠囊中的鹽酸乙胺丁醇的生物利用度F為(107.60±47.0)％。
　　多劑量組結(jié)果:受試制劑和參比制劑利福平的實測Tmax分別為(4.60±0.37)和(1.91±0.66)h，實測Cmax分別為(9.73±1.82)和(9.35±1.31)mg·L-1，梯形法算得AUCss分別為(51.20±7.84)和(40.16±5.97)mg

11、·h/L，Ka分別為(0.39±0.11)和(1.52±1.83)h-1，t1/2分別為(3.91±3.21)和(2.16±0.58)h;異煙肼的實測Tmax分別為(1.00±0.30)和(0.87±0.45)h，實測Cmax分別為(4.52±1.14)和(4.12±1.05)mg/L，梯形法算得AUCss分別為(12.30±5.75)和(12.28±2.05)mg·h/L，Ka分別為(5.55±7.76)和(4.54±5.54)h-1

12、，t1/2分別為(1.77±0.77)和(1.57±0.20)h;吡嗪酰胺的實測Tmax分別為(1.58±0.58)和(1.47±0.52)h，實測Cmax分別為(39.75±7.30)和(44.10±10.97)mg/L，Ka分別為(4.13±5.67)和(3.81±1.43)h-1，t1/2分別為(8.48±0.74)和(9.14±1.18)h;乙胺丁醇的腎排速率分別為(1.15±0.55)和(5.74±10.24)h-1。

13、　　結(jié)論：
　　1.本研究建立的復(fù)方利福平雙釋放膠囊各組分的定量分析方法可用于固定劑量利福平的藥代動力學(xué)研究。20名健康志愿者口服抗結(jié)核固定劑量復(fù)方制劑復(fù)方利福平雙釋放膠囊后耐受性好，可在受試者體內(nèi)可達到并維持有效的血藥濃度。所有效能指標均符合藥代動力學(xué)及生物等效性的試驗要求。
　　2.本試驗對受試制劑和參比制劑進行的藥代動力學(xué)及生物等效性評價，考察AUC0-∞,AUC0-t，T1/2，Cmax，Tmax等多個指標。闡明復(fù)方