金黃色葡萄球菌毒素基因分布及其表達(dá)研究.pdf

1、關(guān)于金黃色葡萄球菌的中毒事件，每年都有很多報道。目前關(guān)于金黃色葡萄球菌的研究主要集中在其致病機理方面，而國內(nèi)關(guān)于金黃色葡萄球菌在食品中的分布及其致病基因在菌株中的分布規(guī)律研究報道較少，對于金黃色葡萄球菌引起的食品安全事件的菌源追溯和控制也就缺乏相應(yīng)的依據(jù)。本研究主要從保定及石家莊區(qū)域采集各種樣品，對樣品中的金黃色葡萄球菌的來源分布進行鑒定，揭示金黃色葡萄球菌在樣品中的分布特性;在此基礎(chǔ)上，利用PCR技術(shù)檢測金黃色葡萄球菌的毒素基因，分析

2、不同毒素基因型菌株在各樣品來源中的分布，探明不同毒素基因型的金黃色葡萄球菌與其來源之間的關(guān)系和規(guī)律性，一旦食品中檢測出金黃色葡萄球菌或發(fā)生食物中毒，根據(jù)檢出菌的毒素基因類型和環(huán)境毒素基因的分布，可以為金黃色葡萄球菌的檢測、爆發(fā)流行的監(jiān)控以及追蹤污染源提供依據(jù);并模擬自然培養(yǎng)條件，在以蛋白質(zhì)為主的培養(yǎng)基中，金黃色葡萄球菌致病性基因轉(zhuǎn)錄表達(dá)的類別，及在不同金黃色葡萄球菌的轉(zhuǎn)錄表達(dá)是否存在差異，研究時序性表達(dá)差異，為判定金黃色葡萄球菌在所污染

3、食品中的毒力提供初步依據(jù)。
　　首先，本研究共采集樣品799份，其中檢出金黃色葡萄球菌的樣品177份，平均檢出率22.2％。所采集樣品中以理發(fā)用具與人體化膿組織檢出率最高，分別為52.0％與52.5％;其次為生鮮肉中的生雞肉，檢出率為44.8％;其余三種生鮮肉檢出率類似，在18％-19％左右;生牛乳的檢出率僅次于生雞肉，為38.3％，速凍食品為35.1％，肉制品27.6％;生肉加工車間、水產(chǎn)品、果蔬、空氣檢出率類似，都在10％左右

4、;豆制品檢出率為4％，水與動物糞便檢出率最低，未檢出。從檢出結(jié)果看，金黃色葡萄球菌在食品中的污染率相對較高，而且動物性蛋白食品的檢出率遠(yuǎn)高于植物性蛋白食品，肉制品或不具備細(xì)胞結(jié)構(gòu)的而營養(yǎng)豐富的動物性蛋白食品如生牛乳，檢出率進一步升高。從污染來源來看，主要有兩個途徑:一是食品原料本身帶菌，主要來源于動物組織或胴體，植物性原料一般污染較少;二是食品加工過程中金黃色葡萄球菌的污染。
　　其次，本研究對金黃色葡萄球菌毒素基因在金黃色葡萄球

5、菌中的分布做了研究，共檢測了426株金黃色葡萄球菌中的14種基因。從結(jié)果看，不同毒素基因的分布規(guī)律與基因功能、菌株來源有密切關(guān)系。不同毒性基因在同一食品來源的金黃色葡萄球菌中的分布不同，而同一毒性基因在不同食品中的分布也不同。毒素基因在金黃色葡萄球菌中的分布與其同源性、遺傳圖譜及調(diào)控基因有關(guān)，但不能起決定作用，需要與外界環(huán)境條件結(jié)合才能決定其分布。毒素基因分布受外界環(huán)境條件的影響，營養(yǎng)條件、溫度等都影響毒素基因的分布。
　　最后，

6、本研究對不同金黃色葡萄球菌菌株的毒素基因在營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中的轉(zhuǎn)錄情況進行了研究。在同一培養(yǎng)條件下，毒素基因的轉(zhuǎn)錄表達(dá)存在菌株差異性，不同菌株表達(dá)的毒素種類不同，同一毒素在不同菌株中表達(dá)不同。金黃色葡萄球菌的溶血毒性的表達(dá)，體外培養(yǎng)就可誘導(dǎo)其毒素基因的轉(zhuǎn)錄表達(dá)，其誘導(dǎo)表達(dá)可能與培養(yǎng)基組成有關(guān)。大部分毒性基因的表達(dá)與報道一致，其產(chǎn)生規(guī)律取決于菌體生長過程或狀態(tài)。腸毒素U、β溶血素、γ溶血素毒素基因的表達(dá)為持續(xù)性表達(dá)，在菌體生長的2h到12h