兔乳腺上皮細胞凋亡的研究.pdf

1、用56只成年日本大耳白母兔進行乳腺上皮細胞凋亡觀察試驗，來探討哺乳動物在泌乳期前后乳腺上皮細胞凋亡數(shù)量及泌乳量變化的規(guī)律。母兔試驗前和期間自由采食和飲水。泌乳前后乳腺上皮細胞凋亡數(shù)量檢測的采樣時間分別為未妊娠、分娩后第2d，8d，16d，24d，32d，39d，46d共8個時間點進行采樣。在前6個時間點各屠宰5只母兔，在后2個時間點各屠宰3只母兔，每只母兔取乳腺組織迅速分別放入平皿置4℃冰箱中保存和放入中性福爾馬林固定液中保存；測量泌乳

2、量的采樣時間分別為分娩后第2d，8d，16d，24d共四個時間點進行采樣，每個時間點測量20窩仔兔吃奶前和吃奶后的體重。 本試驗采用蘇木素-伊紅染色法、免疫組織化學(xué)SP染色法、流式細胞儀分析法檢測母兔泌乳前后乳腺上皮細胞凋亡數(shù)量；采用仔兔吃奶前后窩體重變化差值測量泌乳量。試驗數(shù)據(jù)均用SAS軟件統(tǒng)計分析。結(jié)果如下：(1)蘇木蘇-伊紅染色，細胞核呈藍色，胞漿呈粉紅色。未妊娠期乳腺腺泡小，腺泡腔內(nèi)無分泌物，腺上皮為單層立方上皮，凋亡細

3、胞核濃縮，呈圓形或新月形，數(shù)量多，與分娩后各期凋亡細胞數(shù)量差異極顯著(P＜0.01)；分娩后2天乳腺腺泡變大，上皮細胞為矮柱狀，細胞核橢圓形，腺泡腔變大，有的腺泡腔內(nèi)充滿漿液，凋亡細胞數(shù)量減少，與分娩后46天的乳腺細胞凋亡數(shù)量相比差異不顯著(P＞0.05)，與分娩后其他各期凋亡細胞數(shù)量差異極顯著(P＜0.01)；分娩后8天，分娩后16天腺泡上皮為矮柱狀或柱狀，細胞核呈圓形，腺泡腔大，腺泡腔內(nèi)充滿乳汁，凋亡細胞數(shù)量逐漸減少，差異不顯著(P

4、＞0.05)；分娩后39天，凋亡細胞數(shù)量逐漸增多，變化顯著(P＜0.01)；(2)免疫組化染色，正常細胞核被染成藍色，凋亡細胞質(zhì)被染成棕褐色。未妊娠母兔與泌乳后各期乳腺組織細胞凋亡數(shù)量差異極顯著(P＜0.01)；分娩后2天與分娩后46天乳腺細胞凋亡數(shù)量差異不顯著(P＞0.05)，與分娩后其他各期差異極顯著(P＜0.01)；分娩后16天與分娩后24天差異不顯著(P＞0.05)；(3)流式細胞儀分析法檢測，未妊娠期母兔乳腺上皮細胞凋亡比率大

5、，泌乳旺期乳腺細胞凋亡比率小。未妊娠期與分娩后各時期凋亡百分率差異極顯著(P＜0.01)；分娩后2天與分娩后8天、分娩后39天、分娩后46天差異不顯著(P＞0.05)；分娩后32天與分娩后46天和未妊娠期差異極顯著(P＜0.01)；(4)母兔的泌乳量從分娩后2天到分娩后8天泌量逐漸增多，但變化不顯著(P＞0.05)，到分娩后16天達到高峰，與其他三期泌乳量差異極顯著(P＜0.01)，分娩后24天泌乳量下降，變化顯著(P＜0.05)。(5