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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:建立新西蘭兔Pg感染的牙周炎、微量Pg內(nèi)毒素血癥及Pg菌血癥模型,觀察正常/高脂飲食對(duì)新西蘭兔炎癥反應(yīng)及動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)程的影響,并探討其中的分子機(jī)制。
方法:⑴高脂飼料建立兔高脂血癥模型,兔第二前磨牙絲線結(jié)扎加Pg接種建立牙周病模型。分組為----ND組:正常飲食;HD組:高脂飲食;ND+Pg+Ligature組:普通飼料喂養(yǎng)+Pg接種+牙周結(jié)扎;HD+Pg+Ligature組:高脂飼料喂養(yǎng)+Pg接種+牙周結(jié)扎。14周后
2、實(shí)施安樂死,行牙周局部的病理形態(tài)學(xué)分析,檢測(cè)血脂情況,ELISA檢測(cè)外周血中炎癥因子(CRP、TNF-α、IL-6、MCP-1)的水平;主動(dòng)脈做HE染色,觀察動(dòng)脈粥樣硬化病理變化,Realtime-PCR檢測(cè)主動(dòng)脈局部TLR-2、TLR-4、TNF-α、CRP、IL-6、MMP-9、MCP-1;Westernblot檢測(cè)NF-κB p65、P38-MAPK及JNK-MAPK蛋白的表達(dá)。⑵行Pg-LPS兔耳緣靜脈注射建立微量?jī)?nèi)毒素血癥模型
3、。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組為----ND組:正常飲食;HD組:高脂飲食;ND+Pg-LPS組:普通飼料喂養(yǎng)+Pg-LPS入血;HD+Pg-LPS組:高脂飼料喂養(yǎng)+Pg-LPS入血。14周后實(shí)施安樂死,各項(xiàng)指標(biāo)的檢測(cè)同實(shí)驗(yàn)一。⑶行Pg菌懸液兔耳緣靜脈注射建立微量菌血癥模型。分組為----ND組:正常飲食;HD組:高脂飲食;ND+Pg組:普通飼料喂養(yǎng)+Pg入血;HD+Pg組:高脂飼料喂養(yǎng)+Pg入血。14周后實(shí)施安樂死,檢測(cè)指標(biāo)同實(shí)驗(yàn)二。
結(jié)果
4、:①在高脂飲食條件下,牙周建模導(dǎo)致的牙周損害更加顯著,動(dòng)脈粥樣硬化病變也最顯著,同時(shí)可見全身及主動(dòng)脈炎癥因子水平升高、P38-MAPK及JNK-MAPK表達(dá)顯著增強(qiáng)。②在高脂飲食條件下,Pg-LPS入血可導(dǎo)致主動(dòng)脈粥樣硬化改變、全身及主動(dòng)脈局部炎癥因子、NF-κB p65、P38-MAPK表達(dá)明顯增強(qiáng)。③單純Pg入血即可導(dǎo)致主動(dòng)脈粥樣硬化改變、全身及主動(dòng)脈局部炎癥因子、NF-κB p65、P38-MAPK及JNK-MAPK表達(dá)明顯增強(qiáng),
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