動(dòng)脈粥樣硬化血脂異常的炎癥免疫機(jī)制及三七皂苷對(duì)其影響.pdf

1、心血管疾病每年導(dǎo)致的死亡人數(shù)已列各類疾病之首，是人類健康的頭號(hào)殺手。心血管疾病中，動(dòng)脈粥樣硬化及其并發(fā)癥不僅占有很大比例，而且動(dòng)脈粥樣硬化還是大多數(shù)心血管疾病的共同病理基礎(chǔ)。大量研究認(rèn)為血清總膽固醇，低密度脂蛋白—膽固醇的水平都是對(duì)冠心病死亡具有意義的預(yù)報(bào)因子，血清總膽固醇增高是致動(dòng)脈粥樣硬化的主要因素，低密度脂蛋白—膽固醇的增高與冠心病日后發(fā)病呈正相關(guān)。但近年臨床流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)大約50％的動(dòng)脈粥樣硬化患者的血脂水平是正常的，說明其他

2、新的重要致病因素的存在。臨床流行病學(xué)調(diào)查還發(fā)現(xiàn)，慢性支氣管炎、前列腺炎、牙齦炎等患者動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)病率高，其缺血性腦中風(fēng)的發(fā)生率也顯著高于非感染/炎癥患者(48％vs24％)，強(qiáng)烈提示炎癥免疫因素在動(dòng)脈粥樣硬化形成中可能具有重要作用。國(guó)外學(xué)者Eynatten等在2004年報(bào)道，炎癥可以使糖尿病患者脂蛋白脂酶活性明顯降低。由于脂蛋白酯酶可以水解低密度脂蛋白和乳糜微粒，在脂質(zhì)代謝中具有重要作用，其活性改變必然會(huì)使血脂水平受到影響，而血脂水平

3、的異常是動(dòng)脈粥樣硬化生成的重要因素，對(duì)此，國(guó)內(nèi)外未見報(bào)道。故本實(shí)驗(yàn)通過在體與離體實(shí)驗(yàn)對(duì)炎癥因素對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化動(dòng)物血脂水平的影響及其機(jī)制進(jìn)行了探索研究。 三七皂苷(totalsaponinsofPanaxnotoginseng，PNS)是三七的主要有效成分，臨床研究證明其可降血脂，并對(duì)多種心血管疾病有良好的防治作用。本實(shí)驗(yàn)在我室既往發(fā)現(xiàn)PNS具有顯著的炎癥免疫調(diào)節(jié)效應(yīng)的基礎(chǔ)上，一并觀察了PNS降血脂作用與其炎癥免疫調(diào)節(jié)效應(yīng)的關(guān)系。

4、 方法采用酵母多糖(3mg/kg，10mg/kg)腹腔注射的方法建立了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(兔)持續(xù)性全身炎癥模型；在動(dòng)物試驗(yàn)中，分別于給藥前、給藥后2、4、6、8周分別用CHOD-PAP法、GPO-PAP法、PVS沉淀法測(cè)定血清TC、TG、LDL濃度；于給藥前、給藥后1、3、6、8周用ELISA法測(cè)定血清TNF-α水平；于給藥前、給藥后4、8周測(cè)定LPL、HL活性(比色法)；于給藥前、給藥后3、6、8周用TBA法測(cè)定血清丙二醛濃度；細(xì)胞培

5、養(yǎng)成功后，經(jīng)4％多聚甲醛固定后，用蘇丹Ⅳ染色，倒置顯微鏡下觀察。培養(yǎng)液中IL-1的水平用ELISA法測(cè)定；細(xì)胞內(nèi)膽固醇的測(cè)定：首先用Folch法抽提泡沫細(xì)胞中脂質(zhì)，然后用CHOD-PAP法進(jìn)行測(cè)定。 結(jié)果1.持續(xù)性全身炎癥模型的建立。Zymosan10mg/kg腹腔注射組外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)和血清TNF-α水平明顯高于對(duì)照組和Zymosan3mg/kg腹腔注射組(p＜0.01)，并在給藥期間無明顯下降；血清TNF-α水平在Zymos

6、an3mg/kg腹腔注射組僅在第二天較對(duì)照組有明顯升高，其余時(shí)間無明顯差異。相關(guān)分析表明，白細(xì)胞計(jì)數(shù)與TNF-α水平呈顯著正相關(guān)(r=0.785，p＜0.01)。 2.炎癥刺激組TC水平(以LDL為主)、TNF-α水平和MDA水平均較對(duì)照組和單純高脂飲食組有顯著升高，且TNF-α水平的變化與TC水平(以LDL為主)的升高呈顯著正相關(guān)(p＜0.01)。在第六周前，單純高脂飲食組與炎癥刺激組甘油三酯水平無顯著差異，第六周后單純高脂飲

7、食組的甘油三酯水平明顯高于炎癥刺激組(p＜0.05)。而炎癥刺激組LPL活性明顯降低，與TNF-α水平、TC水平(以LDL為主)呈顯著負(fù)相關(guān)(p＜0.01)。HL活性變化不明顯。 3.三七組TC水平(以LDL為主)、TNF-α水平和MDA水平均較對(duì)照組和持續(xù)性全身炎癥疊加高脂飲食組有顯著降低，且其對(duì)TC水平(以LDL為主)升高的治療效果與其降低TNF-α的水平呈顯著正相關(guān)(p＜0.01)，三七治療組TG水平在6至8周較模型組有明

8、顯下降。三七組LPL活性較持續(xù)性全身炎癥疊加高脂飲食組明顯升高，與TNF-α水平、TC水平(以LDL為主)呈顯著負(fù)相關(guān)(p＜0.01)。HL活性變化不明顯。 4.炎癥刺激組泡沫細(xì)胞內(nèi)膽固醇含量比對(duì)照組升高65.53％，PNS組細(xì)胞內(nèi)膽固醇含量比炎癥刺激組顯著降低，同時(shí)膽固醇含量的變化與培養(yǎng)液中細(xì)胞因子(TNF-α)的水平成顯著相關(guān)，且呈劑量依賴性。 結(jié)論1.炎癥刺激可以導(dǎo)致兔血脂代謝紊亂，使血中膽固醇的濃度明顯升高，且其

9、中以低密度脂蛋白膽固醇的升高為主。其機(jī)制與炎癥刺激使TNF-α等炎癥因子水平升高，從而降低脂蛋白脂酶活性有關(guān)。2.炎癥刺激可以增加細(xì)胞TNF-α、IL-1的分泌，明顯促進(jìn)氧化型低密度脂蛋白向巨噬細(xì)胞內(nèi)的聚集，從而促進(jìn)泡沫細(xì)胞的形成。三七皂苷可以降低由炎癥引起的泡沫細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)沉積的增加，減少泡沫細(xì)胞的形成。其機(jī)制與三七皂苷減少炎癥因子分泌量的作用有關(guān)。3.三七皂苷可以明顯改善炎癥刺激導(dǎo)致的血脂代謝紊亂，降低血清中膽固醇的含量(以低密度脂蛋