版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認領
文檔簡介
1、目的:
脊髓損傷(spinal cord injury,SCI)是臨床常見多發(fā)病,其致殘率高,發(fā)病率逐年攀升,在眾多療法中,嗅鞘細胞(olfactory ensheathing cells,OECs)移植的療效最佳。臨床移植的細胞源于流產(chǎn)胎兒的嗅球,其來源少,時間、地點不確定,而需要臨床移植治療的SCI病人亦同樣存在時間、地點不固定等問題。流產(chǎn)胎兒的嗅球需要及時取材培養(yǎng),因OECs不能無限傳代,且在培養(yǎng)過程中極易受成纖維等
2、雜細胞的污染,培養(yǎng)10-14天即需移植,因此,細胞培養(yǎng)與臨床移植間存在時間和區(qū)域差,極大限制了其臨床應用。因OECs來源少,為有效利用資源,造福更多脊髓損傷患者,需幫助OECs安全地度過時間和區(qū)域差,因此細胞的保存非常重要。本試驗的目的是探討OECs長期保存的最佳方式及OECs保存的時限等問題,為臨床應用提供理論依據(jù)。
材料與方法
取2.0個月齡雄性健康Wistar大鼠的嗅球,進行OECs培養(yǎng),收集對數(shù)生長期
3、細胞,隨機分為五組,A組和D組:1號凍存液懸?。籅組和E組:2號凍存液懸?。籆組:3號凍存液懸?。?0%DMSO、5%DMSO-6%HES、5%DMSO分別為1、2、3號凍存液的低溫保護劑)。A組、B組、C組采用冰箱降溫液氮保存方式;D組和E組采用程控降溫儀降溫液氮保存方式。標本保存一月、三月和半年后復蘇,鏡下觀察復蘇標本的細胞形態(tài),行MTT比色法、臺盼藍染色法(TBR)檢測標本活性,各指標均行組間組內(nèi)對比。
結(jié)果:
4、> 鏡下見5%DMSO-6%HES組標本復蘇細胞胞體透光度和立體感較好,皺縮細胞及裂解細胞碎片少,細胞貼壁和增殖較快;5%DMSO組易見皺縮細胞和細胞碎片,胞體透光度和立體感差的細胞數(shù)量多,細胞貼壁時間長且增殖慢;而10%DMSO組居于二者之間。
標本保存一月、三月及半年后復蘇,其中:1.同種保存方式下,組內(nèi)差異不顯著(P>0.05);2.同種低溫保護劑下,冰箱降溫液氮保存與程控降溫儀降溫液氮保存相比,差異不顯著(P
5、>0.05);3.不同低溫保護劑下,5%DMSO-6%HES組細胞的活性比10%DMSO組好,差異顯著(P<0.05);10%DMSO組比5%DMSO組好,差異顯著(P<0.05)。
冰箱降溫液氮保存三月,復蘇細胞繼續(xù)培養(yǎng)5天檢測,B組細胞的活性比A組和C組均好,差異顯著(P<0.05);A組比C組好,差異顯著(P<0.05)。
1、2和3號凍存液隨機分組懸浮OECs,室溫放置2小時后檢測,每組細胞的活性均有
6、下降,10%DMSO組明顯低于另兩組,差異顯著(P<0.05);而后兩組差異不顯著(P>0.05)。
標本低溫保存半年后復蘇,細胞不再洗滌,繼續(xù)存于原凍存液內(nèi),室溫下放置不同時間,每組細胞活性均下降,以10%DMSO組影響最大。
結(jié)論:
1.選取OECs凍存液時,主張使用5%DMSO-6%HES作為低溫保護劑;
2.對于小樣本OECs的保存,選用冰箱降溫液氮保存方式;
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 大鼠嗅鞘細胞的純化及活性檢測.pdf
- 不同保存介質(zhì)對脫位牙牙周膜細胞活性的影響.pdf
- 低能量激光照射對體外培養(yǎng)嗅鞘細胞的影響.pdf
- 嗅鞘細胞移植對大鼠腦梗死慢性期影響.pdf
- 不同劑量嗅鞘細胞靜脈移植治療脊髓損傷的實驗研究.pdf
- 嗅鞘細胞對脊髓損傷大鼠軸突再生的作用.pdf
- 嗅鞘細胞移植對大鼠脊髓損傷后運動功能影響的研究.pdf
- 人胚胎嗅鞘細胞的體外培養(yǎng).pdf
- 成人嗅粘膜嗅鞘細胞體外培養(yǎng)的實驗研究.pdf
- 嗅鞘細胞對螺旋神經(jīng)節(jié)細胞離體培養(yǎng)的影響及其機制的研究.pdf
- 不同保存方法對豬關節(jié)軟骨細胞存活率及代謝活性的影響.pdf
- pH和游離血紅蛋白對體外培養(yǎng)嗅鞘細胞存活的影響.pdf
- 不同來源嗅鞘細胞治療脊髓損傷模型效果及機制的研究.pdf
- 不同冷凍保護劑對冷凍保存大鼠皮膚活性的影響.pdf
- 嗅鞘細胞(OECs)的分離培養(yǎng)及其應用初探.pdf
- 不同時間嗅鞘細胞移植聯(lián)合電針對大脊髓損傷后Nestin表達的影響.pdf
- 不同保存方案對山羊精液液態(tài)保存的影響.pdf
- 光感基因活化嗅鞘細胞的體外研究.pdf
- 枸杞多糖與黃芪注射液對原代培養(yǎng)的大鼠嗅鞘細胞增殖的影響.pdf
- 嗅成鞘細胞和雪旺細胞基因表達差異的研究.pdf
評論
0/150
提交評論