不同時間嗅鞘細(xì)胞移植聯(lián)合電針對大脊髓損傷后Nestin表達(dá)的影響.pdf

1、目的:在不同時間點(diǎn)，應(yīng)用嗅鞘細(xì)胞聯(lián)合電針治療脊髓損傷大鼠，觀察脊髓巢蛋白(Nestin)陽性細(xì)胞的表達(dá)情況，確定最佳的治療“時間窗”。
　　方法:體外進(jìn)行分離培養(yǎng)大鼠嗅鞘細(xì)胞，培養(yǎng)至2周時，調(diào)整至濃度2×105/L待移植。將大鼠分為對照組、模型組、嗅鞘細(xì)胞聯(lián)合電針治療組（按不同時間點(diǎn)分為:立即移植組、3天后移植組、7天后移植組），分別按相應(yīng)時間點(diǎn)移植入培養(yǎng)好的嗅鞘細(xì)胞，電針干預(yù)時間同嗅鞘細(xì)胞移植時刻，給予夾脊穴和足三里穴電刺激，每

2、天1次，每次30 min。2周后，取各組大鼠損傷節(jié)段脊髓，進(jìn)行免疫組織化學(xué)檢測，觀察各組巢蛋白陽性細(xì)胞的表達(dá)情況。并對損傷區(qū)域進(jìn)行HE染色，觀察脊髓損傷后局部區(qū)域的病理結(jié)構(gòu)的改變過程，以及脊髓損傷后8周的脊髓的修復(fù)情況。采用改良Rivlin斜板試驗(yàn)和脊髓運(yùn)動功能BBB評分法對各組大鼠脊髓損傷后的行為及后肢運(yùn)動功能進(jìn)行評定。對各組實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)統(tǒng)計(jì)分析。
　　結(jié)果:HE染色結(jié)果示:脊髓橫切損傷后，發(fā)生了出血水腫、變性、壞死以及囊

3、腔形成，伴有膠質(zhì)細(xì)胞增生和神經(jīng)細(xì)胞的減少，其病理改變主要集中在脊髓損傷后一周時間;脊髓損傷8周后，對照組可見損傷區(qū)域僅一側(cè)愈合連接，兩斷端結(jié)構(gòu)紊亂;立即組部分愈合連接，兩斷端結(jié)構(gòu)與對照組相比較，疏網(wǎng)狀改變及神經(jīng)軸索周圍間隙有所減輕;3天組雖然斷端兩側(cè)均愈合連接，但形成明顯空洞;7天組未見明顯空洞形成。各組巢蛋白陽性細(xì)胞的表達(dá)結(jié)果顯示;空白組僅見極少量Nestin陽性細(xì)胞;模型組、移植組與聯(lián)合組在脊髓損傷后Nestin陽性細(xì)胞數(shù)增加。其中

4、，7天組的巢蛋白陽性細(xì)胞值及積分光密度值明顯高于其他兩組（P＜0.05），3天組的巢蛋白陽性細(xì)胞值及積分光密度值明顯高于立即組（P＜0.05）。各組大鼠后肢功能BBB評分結(jié)果顯示:3周內(nèi)各組無明顯差異。7天組在術(shù)后3周達(dá)到(7.825±1.333)分，后肢功能恢復(fù)明顯優(yōu)于其他組，恢復(fù)迅速（P＜0.05);3天組與立即組術(shù)后3周評分達(dá)到(5.500±0.252)分和(5.067±0.367)分，二者無明顯差異（P＞0.05）;治療組評分均