反義微小miR-29b對體外膀胱癌細胞生長的作用.pdf

1、目的：觀察微小microRNA-29b（miR-29b）反義寡核苷酸（ASODN）對體外人膀胱癌細胞株BIU87細胞生長的影響，探討反義微小miR-29b（AS-miR-29b）對膀胱癌BIU87細胞發(fā)生發(fā)展的可能機制。
　　方法：應(yīng)用質(zhì)粒介導的反義寡核苷酸（AS-miR-29b）轉(zhuǎn)染人膀胱癌細胞株BIU87細胞。確定能夠轉(zhuǎn)染成功后，轉(zhuǎn)染后的膀胱癌細胞miRNA-29b相對表達量應(yīng)用熒光定量PCR法檢測。然后分別通過MTT比色法、

2、transwell、流式細胞計數(shù)實驗分別檢測AS-miR-29b對BUI87細胞的增殖、侵襲能力、凋亡的影響，AS-miR-29b轉(zhuǎn)染組與轉(zhuǎn)染無義序列組和空白對照組相對比。
　　結(jié)果：1.質(zhì)粒介導的反義寡核苷酸（AS-miR-29b）可在膀胱癌BIU87細胞中成功表達，通過流式檢測轉(zhuǎn)染效率，其中1:3組轉(zhuǎn)染效率最高，達到55.7％。2.實時熒光定量PCR實驗，結(jié)果AS-miR-29b的表達在轉(zhuǎn)染組與陰性對照組及空白對照組相比，表達

3、明顯上調(diào)，差異有顯著性（P<0.05）。3. MTT實驗細胞計數(shù)后，結(jié)果表明轉(zhuǎn)染 AS-miR-29b組與其他兩組相比，BIU87細胞生長速度減慢，細胞增殖受限，有顯著差異性（P<0.05）。4. Transwell行侵襲實驗，轉(zhuǎn)染AS-miR-29b組與轉(zhuǎn)染無義序列組和空白對照組相比，穿過基質(zhì)膠的細胞計數(shù)明顯減少，侵襲能力減弱，差異有顯著性（P<0.05）。5.流式細胞學檢測凋亡及壞死，BIU87細胞的凋亡和壞死比例在轉(zhuǎn)染 AS-mi